ICS13.060 CCSZ16 54 西藏自治区地方标准 DB54/T0487—2025 水质11种抗生素类化合物的测定高效液 相色谱串联质谱法 2025-07-23发布 2025-08-23实施 西藏自治区市场监督管理局  发布DB54/T0487—2025 I目次 前 言............................................................................II 1范围.................................................................................1 2规范性引用文件.......................................................................1 3术语和定义...........................................................................1 4方法原理.............................................................................1 5干扰与消除...........................................................................1 6试剂和材料...........................................................................1 7仪器和设备...........................................................................3 8样品制备.............................................................................3 9分析步骤.............................................................................4 10结果计算与表示......................................................................5 11精密度和正确度......................................................................7 12质量保证和质量控制..................................................................7 13废物处理............................................................................7 附录A（规范性）A.1方法的检出限和测定下限......................................8 附录B（资料性）B.1目标化合物、内标物的多离子反应监测条件......................9 附录C（资料性）C.1方法的精密度和正确度.......................................10DB54/T0487—2025 II前言 本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由西藏自治区生态环境监测中心提出。 本文件由西藏自治区生态环境保护厅归口。 本文件起草单位：西藏自治区生态环境监测中心，中国科学院青藏高原研究所，西藏大学。 本文件主要起草人：索娜卓嘎，袁跃甫，央金拉姆，边巴卓玛，周云桥，贾小华，王彩红，晋美占 堆，次仁央金，张惠芳，赵矿，王小萍，董慧科，张继峰，童银栋。DB54/T0487—2025 1水质11种抗生素类化合物的测定高效液相色谱串联质谱法 1范围 本文件规定了使用高效液相色谱串联质谱法测定11种抗生素类化合物的规范性引用文件、术语和定 义、方法原理、干扰与消除、试剂和材料、仪器和设备、样品制备、分析步骤、结果计算与表示、精密 度与正确度、质量保证和质量控制和废物处理等基本要求。 本文件适用于地表水和污水中11种抗生素类化合物的测定。 当取样量为1000ml，定容体积为1.0ml，进样体积为5μl时，本文件的方法检出限为0.003μg/L～ 0.006μg/L，测定下限为0.010μg/L～0.023μg/L。 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 HJ91.1污水监测技术规范 HJ91.2地表水环境质量监测技术规范 HJ493水质样品的保存和管理技术规定 HJ494水质采样技术指导 3术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4方法原理 水中的11种抗生素类化合物经固相萃取法富集、净化后，用液相色谱串联质谱法分离检测。根据化 合物的保留时间和特征离子峰定性，内标法定量。 5干扰与消除 金属离子与目标化合物能形成络合物，使固相萃取效率降低，可向水样中加入乙二胺四乙酸二钠抑 制络合物的形成。 6试剂和材料1) 试剂。 1)警告——本方法所使用的有机溶剂对人体健康有害，试剂配制和样品前处理过程应在通风橱内进行，操作时应按规定要求佩戴防护器 具，避免接触皮肤和衣服。DB54/T0487—2025 2除非另有说明，分析时均使用符合国家标准的分析纯试剂，实验所用纯水为GB/T6682中规定的一 级水。 6.1.1乙腈(CH3CN)：色谱纯。 6.1.2甲醇(CH3OH)：色谱纯。 6.1.3甲酸(HCOOH)：色谱纯。 6.1.4乙酸铵(CH3COONH4)：色谱纯。 6.1.5盐酸：c(HCl)=12mol/L：优级纯。 6.1.6硫酸：c(H2SO4)=18.4mol/L：优级纯。 6.1.7抗坏血酸(C6H8O6)：分析纯。 6.1.8乙二胺四乙酸二钠(C10H14N2Na2O8)：分析纯。 6.1.9氢氧化钠(NaOH)：分析纯。 6.1.10盐酸溶液：c(HCl)=0.5mol/L：量取4ml盐酸（6.1.5），缓慢加入到水中并定容至100ml。 6.1.11硫酸溶液：c(H2SO4)=4.0mol/L：量取22ml硫酸（6.1.6），缓慢加入到水中，待温度降低至 室温后，用水定容至100ml。 6.1.12氢氧化钠溶液：c(NaOH)=1.0mol/L：称取4gNaOH（6.2.9），用水溶解后，转移到100ml 容量瓶中，定容至标线。 6.1.132mmol/L乙酸铵/0.2%甲酸水溶液：称取154mg乙酸铵（6.1.4），用水溶解后加入2ml甲酸 （6.1.3），转移到1L容量瓶中，定容至标线。 6.1.14甲醇/水溶液(ψ=5%)：量取50ml甲醇（6.1.2），用水定容至1L。 6.1.15甲酸/甲醇溶液(ψ=0.1%)：量取1ml甲酸（6.1.3），用甲醇（6.1.2）定容至1L。 6.1.16氮气：纯度≥99.99%。 标准溶液 6.2.1标准储备液（c=100mg/L） 准确称取10.0mg抗生素类化合物标准物质（纯度大于95%），用甲醇（6.1.2）溶解后，转移到100 ml棕色容量瓶中定容至标线，此溶液可在-10℃下避光可保存1年。对于氟喹诺酮类抗生素，溶于含0.5% 1.0mol/LNaOH（6.1.12）的甲醇溶液中。也可以直接购买有证标准溶液，参照制造商的产品说明书保 存。 6.2.2脱水红霉素（c=2mg/L） 取400μl100mg/L红霉素储备液于20ml棕色瓶中，加入19.6ml甲醇，然后加入约10μl硫酸溶液 （6.1.11）调pH至3.0，室温下震荡4h，于-10℃避光可保存2个月。 6.2.3标准使用液（c=1mg/L）DB54/T0487—2025 3将标准储备液（6.2.1）用适量的甲醇（5.1.2）稀释，现用现配。 6.2.4内标储备液（c=100mg/L） 准确称取10.0mg内标标准物质（纯度大于95%），用甲醇（6.1.2）溶解后，转移到100ml棕色容量 瓶中，定容至标线。此溶液在-10℃下避光可保存1年。也可以直接购买有证标准溶液，参照制造商的产 品说明书保存。 6.2.5内标使用液（c=1mg/L） 将内标储备液（6.2.4）用适量的甲醇（6.1.2）稀释，现用现配。 7仪器和设备 仪器 高效液相色谱串联三重四极杆质谱仪：配有电喷雾离子化源（ESI），具备梯度洗脱和多反应监测 功能。 设备 7.2.1色谱柱：填料粒径为1.8μm、柱长100mm、内径2.1mm的C18反相色谱柱或其他等效色谱柱。 7.2.2固相萃取装置：自动或手动，流速可调节，配有真空系统和缓冲瓶。 7.2.3浓缩装置：自动氮吹浓缩仪等性能相当的设备。 7.2.4玻璃纤维滤膜：孔径为0.7μm。 7.2.5固相萃取柱：6ml，500mg，60μm亲水亲油平衡反相吸附固相萃取柱，亲脂性二乙烯苯和亲 水性N-乙烯基吡咯烷酮聚合物填料（或其他等效填料），聚