SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T4562—2016 转基因检测实验室测量不确定度评估指南 Guidance on measurement uncertainty for GMO testing laboratories 2016-08-23发布 2017-03-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T4562—2016 目 次 前言 1 范围 2 规范性引用文件 3 术语和定义 4 符号和缩略语 5 测量不确定度评估 5.1 概述 5.2 测量不确定度的评估方法 5.3 测量不确定度的评估和使用的一般描述 5.4 利用协同实验数据计算测量不确定度并通过内部质控数据确认 5.5 用内部质控数据计算测量不确定度 5.6 测量不确定度的评估 5.7 临界水平的计算…· 12 5.8 检测限和定量限的计算 5.9 结果报告 13 5.10 均值的不确定度评估 5.11 如何使用测量不确定度 14 5.12 其他影响因素 14 附录A（资料性附录） 为确定实时荧光PCR方法准确度的国际协同实验实例 16 附录B（资料性附录） 基于单一实验室结果的不确定度评估实例 19 附录C（资料性附录） 数据处理产生不确定度的实例 22 SN/T4562—2016 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 的EUR22756EN《转基因检测实验室测量不确定度指南》（Guidancedocumentonmeasurementun- certaintyforGMOtestinglaboratories）。本标准与EUR22756EN相比较，除编辑性修改外，技术内 容完全相同，文本结构基本一致。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国北京出入境检验检疫局、中华人民共和国汕头出人境检验检疫 局、中国合格评定国家认可委员会。 本标准主要起草人：梁新苗、蔡颖、郭铮蕾、李宏、饶红、骆卫峰、周广彪、韩玥、马丹、徐娜、刘若思。 SN/T4562—2016 转基因检测实验室测量不确定度评估指南 1范围 本标准规定了转基因检测实验室测量不确定度评估的方法、报告与表示。 本标准适用于单一转基因品系材料事件特异性成分的定量检测（如实时荧光PCR法）过程的测量 不确定度评估。 2规范性引用文件 2 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 ISO21570一2005食品转基因产品定量及定性检测基于定量核酸法（Foodstuffs—Methods of analysis for the detection of geneticallymodified organisms and derived products—Quantitative nu- cleic acid based methods) ISO/IEC指南98-3：2008测量不确定度第3部分：测量不确定度表示指南[Uncertaintyof measurement--Part 3:Guide to the expression of uncertainty in measurement(GUM:1995)J 欧盟法规（EC)No1829/2003转基因食品和饲料（EuropeanParliamentandoftheCouncilof22 September2003on genetically modified food and feed) 欧盟法规（EC)No1830/2003转基因生物的溯源及标识以及食品和饲料中转基因的溯源 (EuropeanParliamentandof theCouncil of22September2003concerningthetraceabilityand label- ling of genetically modified organisms and the traceability of food and feed products produced from ge- neticallymodifiedorganismsandamendingDirective2001/18/EC) 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 测量不确定度 measurementuncertainty;MU 表征合理地赋予被测量之值的分散性，与测量结果相联系的参数。 注1：此参数可以是诸如标准差（或其倍数），或说明了置信区间的半宽度。 些分量则用基于经验或其他信息假定概率分布估算，也可用标准差表征。 注3：测量结果应理解为被测量之值的最佳估计，全部不确定度分量均贡献给了分散性，包括那些由系统效应引人 的，如与修正值和参考测量标准有关的分量。 3.2 正确度 accuracy 测试结果和认可参考值的一致性。 3.3 适用性 Eapplicability 对方法适用的目标物、基质和浓度的描述。 SN/T4562—2016 3.4 偏移bias 通过大量实验结果得出的平均值和参考值（定值或标称值)之间的差异。对于正确度的衡量通常用 偏移来表示。 3.5 临界水平critical level;LC 有充分的可信度认为存在目标物的最小测量结果。 3.6 动态范围一定量检测范围dynamicrange一rangeofquantification 方法能够呈现线性特征，并且准确度和精密度都在可接受水平的浓度范围。 3.7 扩展测量不确定度 expandedmeasurementuncertainty 扩展不确定度(U)可以计算更高置信水平时的测量值范围。U通过合成标准不确定度乘以包含因 子k得到。因子k取决于选择的置信水平。置信水平为95%时，如果自由度>2，k一般是2。 3.8 检测低限limitofdetection；LOD 能够可靠检测出目标物的最低浓度，但不一定能够定量。LOD一般采用检测方法至少95%的次 数以上（5%假阴性结果)能够检测出目标物的最低浓度表示。 3.9 定量检测低限limitofquantification;LOQ 在可接受的准确度和精密度水平上，能够定量检测的样品中目标物的最低浓度。 3.10 实用性 practicability 操作简便性、样品通量、成本、达到所需的方法性能要求等方面是可行的，并且满足特定目的。总的 来说，方法从满足特定目的方面应该是实际可行的。 3.11 可重复性标准偏差 repeatability standard deviation;RSDr 在重复性条件下获得的检测结果的标准偏差。重复性条件指的是：在同一实验室，同一个操作者使 用相同的仪器设备，在短时间间隔内采用同样的检测方法，对同一实验样品进行检测。 3.12 重现性标准偏差 reproducibilitystandard deviation;RSD 在重现性条件下获得的实验结果的标准偏差。重现性条件指的是：由不同实验室的不同操作者，使 用不同的设备，用同一方法对同样的样品进行检测。 3.13 回收率 recovery 存在或添加到样品中的目标物，通过测试方法提取并检出的量的比例。 3.14 稳健性robustness 分析方法的稳健性是指在通常的使用情况下，检测方法不受微小，但有意的方法参数改变的影响， 仍然能保持其测量可靠性的能力。 3.15 sensitivity 灵敏度 方法灵敏度是指对一定量的目标物引起响应程度的测量。方法灵敏度应该能满足相关法规对检 2 SN/T4562—2016 测/定量阈值的要求， 由于灵敏度随不同方法或不同检测目的而不同，应在方法操作程序中予以注明。灵敏度的合理目 标是达到合同规定的水平，而且确定这个水平不超过所需的限量。 通常用两种方式来表示灵敏度：LOD和曲线斜率。衡量方法检测少量目标物的能力时可优先选 择LOD。 3.16 特异性specificity 方法对检测目标物或参数唯一性响应的特性。 3.17 标准不确定度 standarduncertainty 表达为标准偏差的测量结果不确定度。 3.18 真实度 trueness 通过大量检测结果得出的平均值和认可参考值之间的一致性。 符号和缩略语 下列符号和缩略语适用于本文件。 AOAC官方分析化学家协会（AssociationofOfficialAnalyticalChemists） 样品浓度（sampleconcentration） CRL共同体参考实验室（CommunityReferenceLaboratory） CRM有证参考物质(CertifiedReferenceMaterial) CTAB十六烷基三甲基溴化铵（cetyltrimethylammoniumbromide） Ct-valueCt值(numberof PCRcyclestopassa setthreshold) DGSANCO健康和消费者保护总理事会（Directorate-GeneralHealthandConsumerProtection) DNA脱氧核糖核酸(deoxyribonucleicacid) ENGL 欧洲GMO检测实验室网络（EuropeanNetworkofGMOlaboratories） ERM? 欧洲参考物质（EuropeanReferenceMaterial） EU 欧盟(EuropeanUnion) EURACHEM欧洲分析化学机构网络（NetworkofanalyticalchemistryorganisationsinEu- rope) GM基因改造（geneticallymodified）