SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 3962—2014 水仙迟季黄化病毒的检疫鉴定方法 Detection and identification of Narcissus late season yellows virus 行业标准信息服务平台 2014-04-09发布 2014-11-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 行业标准信 中华人民共和国出人境检验检疫 行业标准 务平台 水仙迟季黄化病毒的检疫鉴定方法 SN/T39622014 * 中国标准出版社出版 北京市朝阳区和平里西街甲2号（100029） 北京市西城区三里河北街16号（100045） 总编室：（010)68533533 网址www.spc.net.cn 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷 * 开本880×12301/16 印张0.75 字数16千字 2014年12月第一版 2014年12月第一次印刷 印数1—1300 * 书号：155066·2-27919 定价18.00元 SN/T3962—2014 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 局、中国检验检疫科学研究院、福建农林大学。 本标准主要起草人：沈建国、廖富荣、马克争、蔡伟、李敏、张志灯、闫诚、张永江、高芳銮、吴祖建。 行业标准信息服务平台 SN/T 3962—2014 水仙迟季黄化病毒的检疫鉴定方法 1范围 本标准规定了水仙迟季黄化病毒检测的程序和方法。 本标准适用于进出境水仙中水仙迟季黄化病毒的检测。 2原理 水仙迟季黄化病毒的血清学和分子生物学特性是制定本检疫鉴定方法的主要依据。水仙迟季黄化 病毒的分类地位、寄主范围、病害症状、分布地区、传播途径、粒体形态、基因组等参见附录A。 仪器设备、用具及试剂 3 3.1仪器设备 高速冷冻离心机、电子天平（1/1000g）、PCR仪、电泳仪、水平电泳槽、一20℃低温冰箱和一80℃ 超低温冰箱、凝胶成像分析系统、pH计、微波炉、磁力搅拌器、恒温水浴锅、高压灭菌锅、超净工作台、酶 标仪等。 3.2用具 各种量程的可调移液器（1000μL、200uL、100μL、20μL、10μL、2μL）、PCR反应管、无RNase离 心管（1.5mL）、研钵、酶联板等。V 3.3试剂 酶联板捕获抗原酶联免疫吸附测定法（plate-trappedantigenELISA，PTA-ELISA）试剂见附录B， 信息服务平台 巢式RT-PCR试剂见附录C。 4木 检测与鉴定 4.1PTA-ELISA 具体方法见附录B。 4.2巢式RT-PCR 具体方法见附录C。 5 结果判定与记录 5.1结果判定 当水仙迟季黄化病毒PTA-ELISA检测结果为阳性，且巢式RT-PCR检测结果也为阳性时，则判 1