ICS 65.020.30 B 44 GB 中华人民共和国国家标准 GB/T14926.22—2001 代替GB/T14926.22—1994 实验动物 小鼠肝炎病毒检测方法 Laboratory animalMethod for examination of mouse hepatitis virus (MHV) 2002-05-01实施 2001-08-29发布 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 GB/T 14926. 22 2001 前言 本标准是对GB/T14926.22一1994《实验动物小鼠肝炎病毒检验方法》的修订。增加了免疫荧光 试验方法。对GB/T14926.221994巾的个别文字做了修改。 本标准出中华人民共和国科学技术部提出并归口。 本标准起草单位：中国实验动物学会、 本标准主要起节人：届殷琴 本标准于1991年1月首次发布、 I 中华人民共和国国家标准 实验动物 GB/T 14926.22—2001 小鼠肝炎病毒检测方法 代替 GR/T 14926.22—1994 Laboratory animal-Method for examination af mousc hepatitis virus (MHV) 1 范围 本标准规定了小鼠肝炎病毒（MHV)的检测方法、试剂等， 本标准适用于小鼠MHV 的检测。 2 引用标准 下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文，本标准出版时.所示版本均 为有效。所有标推都会被修订，使用本标谁的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性， GB/T14926.50—2001实验动物酶联免疫吸附试验 GB/T14926.51—2001实验动物免疫酶试验 GB/T14926.52—2001实验动物免疫荧光试验 3原理 根据免疫学原埋,采用MHV抗原检测小鼠血清巾MHV抗体。 4主要试剂和器材 4.1 试剂; 4.1. 1 FI.ISA 抗原 4.1.1.1特性抗原 MHV(包括MHV,、MHV、MHV-A、MHV-JHM 四个毒株)感染DBT 或L929细胞,接种后 2~ 1d.病变达十十十～十十十十时收获。冻融二次或超声波处理后，低速离心去除细胞碎片，上清液再经 超速离心浓缩后制成ELISA抗原。 4.1. 1.2正常抗原 4.1.2抗原片 MHV 感染IDBT 或I.929 细胞，接种后 12,病变达十十r~十十+时用胰酶消化分敏,PBS洗涤： 涂片，室温T燥后，冷丙酮固定10 min，一20℃保存 4. 1. 3 内性血清 MHV抗原免疫清洁或SPF小鼠所获得的抗血清。 4. 1.4 阴性血清 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局2001-08-29 批准 2002-05-01实施 1