ICS 65.020.30 B 44 GB 中华人民共和国国家标准 GB/T14926.25—2001 代替GB/T14926.25—1994 实验动物 呼肠弧病毒而型检测方法 Laboratory animalMethod for examination of reovirus 3 (Reo3) 2002-05-01实施 2001-08-29发布 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SAG GB/T 14926. 25—2001 前 言 本标准是对GB/T14926.251994《实验动物 切呼肠孤病毒皿型检验方法》的修订。对检测方法未 作改动，仅对原标准的个别文字作了修改 本标准由中华人民共和国科学技术部提山并归口 本标准起草单位：中国实验动物学会 本标准主要起草人：川霞琴 本标准丁1994年1月苔次发布。 I 中华人民共和国国家标准 实验动物 GB/T 14926.25—2001 呼肠孤病毒型检测方法 代替 GB/T 11926. 25—1991 Laboratory animal-Method for examination of reovirus 3 (Ren3) 1范围 本标准规定了呼肠孤病毒亚型(Rco3)的检测方法、试剂等。 本标准适用丁小鼠、人鼠、地鼠、豚鼠Reo3的检测。 2引用标准 下列标准所包含的条文，通过在本标滩巾引川而构成为本标准的条文。本标滩山版时，所示版本均 为有效。所有标雅都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用卜列标准最新版本的可能性。 GB/T14926.50一2001实验动物酶联免疫吸附试验 GIB/T11926.512001实验动物免疫酶试验 GB/T14926.52—2001实验动物免疫荧光试验 3原理 根据免疫学原理,采用Reo3抗原检测小鼠，人鼠,地鼠、豚鼠血清巾Reo3 抗体。 4主要试剂和器材 4. 1 试剂: 4. 1. 1 FI.ISA 抗原 4.1.1.1特异性抗原 Rco3 感染 BSC 1或 BHK21细胞,当病变达十十+～·＋+二+时,收获培养物。冻融三次或超声波 处理后低速离心去除细胞僻片，上清液冉经趋速离心浓缩后制成EI.1SA抗原。 4.1.1.2正常抗原 4.1.2抗原片 Reo3 感染 BHK21 细胞,培养 4~～5 d,病变达十十～十十十时用胰酶消化分散,PBS 洗涤,涂片,室 温干燥的同时.在紫外线下20cm处照30 min。冷丙酮固定10min，一20保存。 4. 1. 3 即性血清 Reo3抗原免疫清洁或 SPF小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠所获得的抗血清、 4. 1. 4 阴性血清 SPF 小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠血清。 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局2001-08-29批准 2002-05-01实施 1