ICS67.050 CCSX04 团体标准 T/SATA041—2023 食品中有机硒含量的测定 高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱法 Determinationoforganicseleniumcontentbyliquidchromatography-inductively coupledplasmamassspectrometryinfoods 2023-03-21发布 2023-04-21实施 深圳市分析测试协会  发布 全国团体标准信息平台 T/SATA041—2023 I目次 前 言............................................................................II 1范围.................................................................................1 2规范性引用文件.......................................................................1 3术语和定义...........................................................................1 4方法原理.............................................................................1 5试剂和材料...........................................................................1 6标准品...............................................................................2 7标准溶液.............................................................................2 8仪器设备.............................................................................2 9分析步骤.............................................................................3 试样制备.........................................................................3 试样提取.........................................................................3 10仪器参考条件........................................................................3 液相色谱参考条件................................................................3 ICP-MS参考条件..................................................................3 标准曲线制作....................................................................3 样品的测定......................................................................4 结果计算和表述..................................................................4 检出限..........................................................................4 精密度..........................................................................4 附录A（资料性）有机硒混合标准溶液的色谱图......................................5 全国团体标准信息平台 T/SATA041—2023 II前言 本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本文件由深圳市分析测试协会提出并归口。 本文件起草单位：华测检测认证集团股份有限公司、格物正源有限公司、深圳市分析测试协会。 本文件主要起草人：邱险辉、罗雯、谢林云、刘伟彬、储成群、单志学、严杏、陈仁熙、郭晓雷、 梁伟方、贾艳艳、胡艳、何婷、荣凤霞、杨涛、张秀芹、杨杰、陈思羽、汪璇、王一晨。 全国团体标准信息平台 T/SATA041—2023 1食品中有机硒含量的测定 高效液相色谱 电感耦合等离子体质谱法 1范围 本文件规定了食品中有机硒液相色谱联用电感耦合等离子质谱法的测定方法。 本文件适用于粮谷、食用菌、酵母、鸡蛋、蔬菜、乳粉、饮料等食品中硒代胱氨酸(SeCys2)、甲基 -硒代半胱氨酸(L-SeMc)、硒代蛋氨酸(SeMet)三种有机硒的测定。 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB/T1.1标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写 GB/T20001.4标准编写规则第4部分：试验方法标准 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 JJF1159四级杆电感耦合等离子体质谱仪校准规范 GB/T27404-2008实验室质量控制规范食品理化检测 3术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4方法原理 有机硒在蛋白酶合适的条件下酶解，以小分子的硒代氨基酸的形式释放出来，再通过液相色谱分离 系统进行组分分离后，电感耦合等离子体质谱仪测定，以保留时间和质荷比定性，峰面积外标法定量。 5试剂和材料 除另有说明，本实验使用试剂均为分析纯，水为GB/T6682中规定的一级水。 甲醇(CH3OH)。 三氟乙酸(C2HF3O2)。 2-(N-吗啉代)乙烷磺酸(C6H13NO4S·H2O,MES)。 氢氧化钠(NaOH)。 盐酸(HCl)：36%。 三羟甲基氨基甲烷(C4H11NO3，TRIS)。 蛋白酶液：CAS9014-01-1，IUB3.2.21.14，300U/mL~400U/mL，不得含丙三醇稳定剂，于0℃ ~5℃冰箱储存。 冰乙酸。 乙酸溶液(3mol/L)：取86mL冰乙酸(5.8)，加入200mL水，混匀后定容至500mL。 全国团体标准信息平台 T/SATA041—2023 2 流动相溶液：98%三氟乙酸水溶液(0.2%v/v)-2%甲醇：取3.92mL三氟乙酸(5.2)，加入1000 mL一级水，再加入40mL甲醇(5.1)，最后用一级水定容至2000mL，过0.45μm有机系滤膜，超声脱 气10min。 氢氧化钠溶液(1mol/L)：称取4g氢氧化钠(5.4)，用水稀释至100mL，混匀。 氢氧化钠溶液(6mol/L)：称取24g氢氧化钠(5.4)，用水稀释至100mL，混匀。 盐酸溶液(1mol/L)：取8.33mL盐酸(5.5)，用水稀释至100mL，混匀。 0.05mol/LMES-TRIS缓冲液：称取19.52g2-(N-吗啉代)乙烷磺酸(5.3)和12.20g三羟甲基 氨基甲烷(5.6)，用1.7L水溶解，20℃时用6mol/L氢氧化钠溶液(5.12)调节pH为8.3，加水稀释 至2L。 蛋白酶溶液：用0.05mol/LMES-TRIS缓冲溶液(5.14)配置成为50mg/mL的蛋白酶溶液，使用 前现配并于0℃~5℃暂存。 有机系滤膜：0.45μm。 氩气或液氩：纯度≥99.99% 氦气：纯度≥99.99% 6标准品 硒代胱氨酸(SeCys2，C6H12N2O4Se2，M=334.09，CAS号：29621-88-3)：纯度≥98%，或采用经国家 认证并授予标准物质证书的单标准贮备液。 甲基-硒代半胱氨酸(L-SeMc，C4H9NO2Se，M=182.08，CAS号：26046-90-2)：纯度≥98%，或采用 经国家认证并授予标准物质证书的单标准贮备液。 硒代蛋氨酸(SeMet，C5H11NO2Se，M=196.11，CAS号：3211-76-5)：纯度≥98%，或采用经国家认 证并授予标准物质证书的单标准贮备液。 无机硒标准溶液：100mg/L，采用经国家认证并授予标准物质证书的硒元素标准贮备液。 7标准溶液 硒代胱氨酸储备液(100mg/L)：称取硒代胱氨酸(6.1)10.2mg于100mL容量瓶中，用一级水定 容，摇匀备用，0℃~4℃避光保存3个月。 甲基-硒代半胱氨酸储备液(100mg/L)：称取甲基-硒代半胱氨酸(6.2)10.2mg于100mL容量瓶 中，用一级水定容，摇匀备用，0℃~4℃避光保存3个月。 硒代蛋氨酸储备液(100