ICS 11.220 CCS B 41 6501 乌鲁木齐市 地方标准 DB 6501/T 044—2023 动物源肺炎克雷伯 菌检验 Examination of Klebsiella pneumoniae of animal origin 2023 - 05 - 25发布 2023 - 06-01实施 乌鲁木齐市市场监督管理局 发布 DB 6501/T 044 —2023 I 目次 前言 ................................ ................................ ................ III 1 范围 ................................ ................................ ............... 1 2 规范性引用文件 ................................ ................................ ..... 1 3 术语和定义 ................................ ................................ ......... 1 4 设备和材料 ................................ ................................ ......... 1 5 培养基和试剂 ................................ ................................ ....... 2 要求 ................................ ................................ ........... 2 培养基 ................................ ................................ ......... 2 试剂 ................................ ................................ ........... 2 6 标准菌株 ................................ ................................ ........... 2 7 生物安全要求 ................................ ................................ ....... 3 8 样品采集与保存运输 ................................ ................................ . 3 鼻拭子、直肠 /泄殖腔拭子 ................................ ......................... 3 生鲜乳样品 ................................ ................................ ..... 3 组织样品 ................................ ................................ ....... 3 9 检验程序 ................................ ................................ ........... 3 10 增菌 ................................ ................................ .............. 4 11 分离纯化 ................................ ................................ .......... 4 12 革兰氏染色镜检 ................................ ................................ .... 4 13 鉴定 ................................ ................................ .............. 4 生化鉴定 ................................ ................................ ...... 4 质谱鉴定 ................................ ................................ ...... 5 PCR鉴定 ................................ ................................ ....... 5 14 结果与报告 ................................ ................................ ........ 6 15 菌株保藏 ................................ ................................ .......... 6 附录A（规范性） 培养基和试剂 ................................ ......................... 7 A.1 营养肉汤（ NB） ................................ ................................ . 7 A.2 麦康凯肌醇阿东醇羧苄青霉素琼脂（ MIAC） ................................ ......... 7 A.3 营养琼脂（ NA） ................................ ................................ . 7 A.5 羧苄青霉素 ................................ ................................ ..... 8 A.6 氧化酶试验试剂 ................................ ................................ . 8 A.7 无菌 0.85 %生理盐水 ................................ ............................ 8 A.8 5%蔗糖脱脂乳保护剂 ................................ ............................. 8 DB 6501/T 044 —2023 II 附录B（资料性） 肺炎克雷 伯菌Khe基因PCR扩增目标片段测序序列 ......................... 10 DB 6501/T 044 —2023 III 前言 本文件按照 GB/T 1.1 —2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件由乌鲁木齐市动物疾病控制与诊断中心提出。 本文件由乌鲁木齐市农业农村局（乌鲁木齐市乡村振兴局）归口并组织实施。 本文件起草单位：乌鲁木齐市动物疾病控制与诊断中心、新疆农业大学动物医学学院、新疆畜牧科 学院兽医研究所（新疆畜牧科学院动物临床医学研究中心）、乌鲁木齐市疾病预防控制中心、新疆农业 科学院农业质量标准与检测技术研究所、乌鲁木齐市米东区畜牧兽医站、乌鲁木齐市米东区三道坝镇农 业畜牧业发展服务中心、乌鲁木齐县畜牧兽医站、乌鲁木齐市达坂城区畜牧兽医站、新疆中科基因科技 有限公司。 本文件主要起草人：蔡扩军、夏俊、陈国利、赵红琼、王兵、徐敏、王涛、杨毅、韩海燕、吴星星、 任皓、贾立敏、周继萍、尚月梅、杨艳梅、马佳妮、马卫平、李 建玲、李兆新、姜玉婷、王六合、吾斯 曼·吾曼尔、赵艳坤、陈贺、彭华刚、方新元、贾伟、帕提玛•努合曼、李丽、陈懿、马晓燕、赵文年、 齐姗姗、宋震宇、赵春山。 本文件实施应用中的疑问，请咨询乌鲁木齐市动物疾病控制与诊断中心。 对本文件的修改意见建议，请反馈至乌鲁木齐市动物疾病控制与诊断中心（乌鲁木齐市南湖西路 15 号）。 乌鲁木齐市动物疾病控制与诊断中心 联系电话： 0991-4643100； 传真：0991-4668587； 邮编：830063 DB 6501/T 044 —2023 1 动物源肺炎克雷伯菌检验 1 范围 本文件规定了动物源肺炎克雷伯菌 （ Klebsiella pneumoniae ） 检验的设备和材料、 培养基和试剂 、 标准菌株、生物安全要求、样品采集与保存运输、检验程序、增菌、分离纯化、革兰氏