ICS 65.020 B 05 吉 DB22 林 省 地 方 标 准 DB 22/T 2256—2018 代替 DB22/T 2256-2015 杂交粳稻不育系鉴定规程 Evaluation protocol of japonica hybrid rice sterile lines 2018 - 05 - 24 发布 吉林省质量技术监督局 2018 - 06 - 22 实施 发 布 DB22/T 2256—2018 前 言 本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 本标准代替DB22/T 2256-2015《杂交粳稻不育系鉴定规程》。与DB22/T 2256-2015相比，除编辑性 修改外主要技术变化如下： ——修改了标准范围中“鉴定方法”； ——修改了“不育系”术语和定义； ——修改了“套袋自交结实率”术语和定义； ——修改了“组织鉴定部门”； ——修改了“面积与规模”； ——修改了“田间鉴定”； ——增加了“花粉败育类型”部分内容； ——增加了“不育系的转基因检测报告”； ——增加了“柱头外露率”部分内容； ——删除了“附录B”。 本标准由吉林省农业委员会提出并归口。 本标准起草单位：吉林省农业科学院。 本标准主要起草人：孟维韧、周广春、全东兴、金成海、时羽、全成哲。 本标准代替了DB22/T 2256-2015。 本标准历次版本发布情况为： ——DB22/T 2256-2015。 I DB22/T 2256—2018 杂交粳稻不育系鉴定规程 1 范围 本标准规定了杂交粳稻不育系鉴定的鉴定条件、鉴定程序、鉴定内容和判定规则。 本标准适用于粳型杂交水稻不育系鉴定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 NY/T 1215 水稻光、温敏雄性核不育系育性鉴定规程 3 术语和定义 下列术语和定义适用本文件。 3.1 杂交粳稻 japonica hybrid rice 由两个遗传背景不同的双亲杂交，产生具有杂种优势的第一代具备粳稻形态特征与生理特性的杂交 种。 3.2 不育系 male sterile line 雄蕊发育不正常，不能产生有功能的花粉，雌蕊正常，能接受正常花粉而受精结实，并能将雄性不 育性遗传给后代的品系。 3.3 纯度 purity 品系在特征特性方面典型一致的程度，用本品系的种子数占供检本作物样品种子数的百分率表示。 3.4 不育株率 sterile plant rate 在调查纯度的各群体内，同型不育株数占供检本作物样品的百分率。 3.5 套袋自交结实率 bagged seed setting rate 总结实粒数占总颖花数的百分率。 3.6 不育度 degree of male sterility 衡量不育系不育程度的指标，以自交不实率和花粉镜检败育率表示。 3.7 败育类型 abotion type 1 DB22/T 2256—2018 按照花粉的败育时期及形态特征，可以分为无花粉型（造孢细胞或花粉母细胞时期败育）、典败型 （单核期败育）、圆败型（二核期败育）、染败型（三核期败育）和核增生花粉败育类型（具有4核或 多核）等5种。 3.8 柱头外露率 percentage of exserted stigma 开花闭颖后柱头露在颖壳外面的比例，分单边外露率（仅一个柱头外露的比例）和双边外露率（两 个柱头都外露的比例）。 3.9 异交结实率 outcrossing rate 所取不育系稻穗结实总粒数占所取不育系稻穗总颖花数的百分比。 4 鉴定条件 4.1 组织鉴定部门 省级（或以上）农业行政主管部门。 4.2 申请鉴定不育系 4.2.1 亲本来源清楚，选育过程翔实。 4.2.2 与现有不育系（系指已受理或鉴定通过的不育系）有明显区别。 4.2.3 主要遗传性状稳定一致，形态特征、生物学特性均表现一致，不育性稳定且符合不育系生产应 用的要求。 4.3 鉴定圃 4.3.1 播期 在当地适于不育系制种的最大播期范围内分1 期～3 期播种，每期间隔7 d～10 d，每期不低于1000 株。 4.3.2 4.3.2.1 4.3.2.2 4.3.3 面积与规模 2 不育系繁殖或杂交组合制种现场，面积各不少于 200 m ，或总种植群体 3000 株以上。 2 不育系配制的杂交组合展示现场，面积不少于 200 m ，或每个组合不少于 200 株。 栽植要求 单本栽插，不准去杂，人为造成的缺株按杂株处理，鉴定现场生态环境与栽培条件应符合鉴定要求， 与当地生产实际条件相近。 5 鉴定程序 5.1 提出鉴定申请 申请时间为每年3月份前申请。 5.2 2 提供以下材料 DB22/T 2256—2018 申请鉴定单位或个人应提供下列材料： a) 水稻不育系鉴定申请表； b) 不育系选育过程及配组利用情况报告； c) 光温敏不育系须提供资质单位出具的人工气候箱育性鉴定结果，包括育性转换临界温度、临界 光长和稳定不育的天数； d) 提供不育系的转基因检测报告、DNA 指纹图谱、DUS 测试（特异性、一致性、稳定性）等知识 产权证明材料； e) 鉴定部门要求的其它材料。 5.3 审查申报材料 审查申请者提供的有关材料，对有关问题进行质询。 5.4 田间鉴定 应有5 名以上相关领域科研、育种专家组成鉴定小组，对不育系有关性状进行田间现场鉴定，形成 田间考察鉴定的书面意见。 6 鉴定内容 6.1 不育系纯度 现场检测不育系群体的一致性，要求检测总株数在3000株以上，纯度应按公式（1）计算。 P%   T  I   100 ................................... (1) T 式中： P ——纯度； T ——总株数； I ——杂株数。 6.2 不育株率 在调查纯度的各群体内，调查同型可育株数，计算不育株率。不育株率应按公式（2）计算。 P%   T  N  100 T .................................. (2) 式中： P ——不育株率； T ——总株数； N ——可育株数。 6.3 套袋自交结实率 各期播种群体，抽穗期达25 d以上的套袋自交穗中随机选取100 个稻穗，计数总颖花数和总结实粒 数，套袋自交结实率应按公式（3）计算。 3 DB22/T 2256—2018 F %  n1 100 .....................................(3) N1 式中： F ——套袋自交结实率； n1 ——总结实粒数； N 1 ——总颖花数。 6.4 花粉不育度 确定花粉主要败育类型，花粉不育度应按公式（4）计算。 P%  n2 100 .................................... (4) N2 式中： P ——花粉不育度； n 2 ——不育花粉粒总数； N 2 ——观测花粉粒总数。 6.5 柱头外露率 在已抽穗的不育系群体中随机选取20个刚结束开花的稻穗，分别计数已开花的颖花总数、柱头单边 外露的颖花数、柱头双边外露的颖花数，柱头单边外露率、柱头双边外露率和柱头外露率，应按公式（5）、 公式（6）和公式（7）计算。 Ps %   n3 100 .................................... (5) N3 式中： Ps ——柱头单边外露率； n 3 ——柱头单边外露的颖花数； N 3 ——已开花的颖花总数。 Pd %   n4  100 .................................... (6) N4 式中： Pd ——柱头双边外露率； n 4 ——柱头双边外露的颖花数； N 4 ——已开花的颖花总数。 Pt %   Ps  Pd ..................................... (7) 式中： Pt ——柱头总外露率； Ps ——柱头单边外露率； Pd ——柱头双边外露率。 4 DB22/T 2256—2018 6.6 异交结实率 在三系不育系繁殖田或杂交组合制种田随机选取5点，选取每点相邻父本间的母本，分别调查所取 稻穗的结实粒数和总颖花数，异交结实率应按公式(8)计算。 FO %   n5  100 ................................... (8) N5 式中： Fo ——异交结实率； n 5 ——所取稻穗结实总粒数； N 5 ——所取稻穗总颖花数。 7 判定规则 不育系鉴定合格应符合如下条件： a) 不育系纯度不低于 99.9%； b) 不育株率不低于 99.9%； c) 套袋自交结实率不高于 0.05%； d) 花粉不育度不低于 99.5%； 注：光温敏不育系除上述指标外，还要求在本地适宜播期内稳定不育的时间达30 天以上。 5 DB22/T 2256—2018 AA 附 录 A （规范性附录） 水稻不育系鉴定申请表 水稻不育系鉴定申请表见表A.1。 表A.1 水稻不育系鉴定申请表 不育系名称 育成年份 申请单位(个人) 育成单位(个人) 申请鉴定日期： 申请者通讯地址： 不育系来源 电话/传真 亲本来源和选育过程(按选育过程以示意图表示)： 主要性状指标： 不育系类型 籼型、粳型 花粉败育类型 核、核质互作 光温敏性 特征 特性 异交结实率(%) (光、温、光温互作) 不育株率(%) 不育度(%) 自交结实率(%) 起始时间/d 开花习性 开花高峰/d 开颖角度 柱头外露率(%) 农艺 性状 生育期(d) 播始历期(d) 植株高度(cm) 分蘖性 品质状况 抗病性 抗逆性 其他性状说明 选配组合情况(已配组合名称及进入国家或省级生产试验情况)： 不育系鉴定现场地点、种植面积、株数及分期播种情况等： 其它附件材料： 1、近2-3年对不育系不育株率、不育度、自交结实率、不同败育类型花粉比例的调查结果； 2、权威部门出具的主要病害抗性鉴定结果； 3、权威部门出具的品质测试结果； 4、光温敏不育系须附权威部门出具的临界温光鉴定结果； 申请者所在单位意见： 盖 章 年 省农作物品种审定委员会办公室受理意见： 日 盖 经办人： _________________________________ 6 月 年 章 月