ICS 13.300 CCS A 80 中华人民共和国国家标准 GB/T21606—2022 代替GB/T21606—2008，GB/T27823—2011 化学品 急性经皮毒性试验方法 ChemicalsTest method of acute dermal toxicity 2023-02-01实施 2022-07-11发布 国家市场监督管理总局 发布 国家标准化管理委员会 GB/T21606—2022 目 次 前言 引言 1 范围 2 规范性引用文件 3术语、定义和缩略语· 3.1 术语和定义 3.2 缩略语 试验方法 4.1 动物种属选择 4.2 饲养条件 4.3 动物准备 4.4 试验内容 5试验数据和报告 5.1试验数据 5.2 试验报告 附录A（规范性） 试验需要考虑因素 附录B（规范性） 检测程序流程图 剂量范围预试验 附录C（规范性） 检测程序流程图 正式试验 参考文献 GB/T21606—2022 前言 起草。 本文件代替GB/T21606—2008《化学品急性经皮毒性试验方法》和GB/T27823—2011《化学品 急性经皮毒性固定剂量试验方法》，与GB/T21606一2008和GB/T27823一2011相比，除结构调 整和编辑性改动外，主要技术变化如下： 增加了“规范性引用文件”一章（见第2章）； a) b）更改了“术语、定义和缩略语”（见第3章，GB/T21606—2008和GB/T27823—2011的第2 章)； c） 2011的附录A和附录B）； e) 删除了GB/T21606一2008的第3章、第5章～第8章、规范性附录B和附录D，删除了 GB/T27823一2011的规范性附录C。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由全国危险化学品管理标准化技术委员会（SAC/TC251）提出并归口。 本文件起草单位：中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所、中国检验检疫科学研究院、中检 科健（天津）检验检测有限责任公司、厦门丰力扬科技有限公司、广东义胜检测有限公司。 本文件主要起草人：李斌、肖经纬、张意、李海山、周丽丽、吕佳琦、陈宵、王海华、李忠生、鱼涛、刘黎、 向小云。 本文件及其所代替文件的历次版本发布情况为： GB/T21606—2008; GB/T27823—2011; ——本次为第一次修订。 1 GB/T21606—2022 引言 根据科学发展和动物福利保护的要求，需要对化学品试验指南进行定期回顾考查和更新。近期，重 要相关期刊汇总分析了数百种农药和千余种工业化学品的急性经口、急性经皮毒性试验结果，发现大于 数据的分类结果。由此可见，依据急性经皮毒性试验所进行的分类对于急性经口毒性试验数据源性的 物质危害分类具有一定的预测价值和相关性。随着毒理学毒性替代方法技术的不断更新，已发布的经 皮毒性试验方法GBT21606—2008和GB/T27823—2011吸需修订和校正。及时修订是必要的，原因 包括： 公认单性别（常为雌性）试验证据充分； 一为增加单一急性经皮毒性LDso的数据价值，需进一步明确置信区间（CI）； 一依据全球化学品统一分类和标签制度（GHS）的原则，设置充分适当的剂量范围有助于受试物 的危害分类。 传统方法在评价急性毒性时常以动物死亡作为唯一毒性终点。1984年，英国毒理学会提出选择固 定剂量进行受试物染毒的方式。该方法有效避免了仅以动物死亡作为观察终点的弊端，将儿个固定剂 量中的某个剂量出现的明显中毒症状作为观察终点，该剂量作为受试物的毒性分级依据。本方法也采 用上述设置固定剂量的方式。 此次文件的更新是基于生物统计分析结果，通过对多个急性经皮毒性试验方案的评估和比较后确 认最优化的试验方案。本方法借鉴急性经口毒性固定剂量法和急性毒性分级的试验方案进行层级化设 计，并综合分析实验动物的死亡率和/或濒死状态开展受试物的急性经皮毒性评价。本试验方案具有高 复现性、动物使用数量少等优点 本方法可提供受试物的危害性质信息。对于可引起急性经皮毒性的受试物，可根据本试验结果，按 照全球化学品统一分类和标签（GHS）的原则，对受试物进行急性经皮毒性的分级和分类。 II GB/T21606—2022 化学品急性经皮毒性试验方法 1范围 本文件规定了化学品急性经皮毒性固定剂量试验方法的术语、定义和缩略语、试验方法、试验数据 和报告。试验需要考虑因素依据附录A。 本文件适用于固定剂量法测试化学品的急性经皮毒性。 规范性引用文件 2 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文 件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于 本文件。 GB14925 实验动物 环境及设施 3术语、定义和缩略语 3 下列术语、定义和缩略语适用于本文件。 3.1术语和定义 3.1.1 急性经皮毒性 Eacutedermaltoxicity 受试物在短时间内（24h以内）一次性经皮染毒所产生的有害作用 3.1.2 剂量 dose 给予受试物的量。 注：表示为实验动物单位体重所给予的受试物量（如，mg/kg）。 3.1.3 濒死impendingdeath 动物在死亡或垂死状态出现前的一种表现 注：啮齿类动物临近死亡的表现包括抽搐、侧卧、斜卧和震颤等（详见人道终点指南文件No.19）。 3.1.4 半数致死量 medianlethal dose LDso 由统计学方法推导出的受试物通过染毒途径暴露可以引起50%动物出现死亡的剂量 注：LDso值用实验动物单位体重的受试物质量（mg/kg）表示。 3.1.5 限量试验 limittest 试验的上限剂量 1 GB/T21606—2022 3.1.6 濒死状态moribundstatus 在即使给予治疗的情况下，动物仍然即将死亡或无法存活的状态。 注：详见人道终点指南文件No.19。 3.1.7 可预见的死亡predictabledeath 出现的临床表现提示动物一定将在试验结束之前的某个时间死亡。 注：例如，丧失了饮水和进食的能力。 3.1.8 受试物 testchemical 指被检测的物质。 3.2 缩略语 GHS：全球化学品统一分类和标签制度（GloballyHarmonizedSystemof Classificationand Labeling of Chemicals) UVCBs：未知或有多种组成成分的物质、复杂的反应产物或生物材料（ChemicalSubstancesof Unknown or VariableComposition,ComplexReaction Products and Biological Materials) 4试验方法 4.1 动物种属选择 4.1.1优先选择健康成年大鼠。常规的急性经口和急性吸入毒性试验研究表明，性别之间的敏感性差 异通常不大，但在存在性别差异时，雌性动物通常更为敏感。但若化学结构相似物质的毒理学或毒代动 力学信息表明雄性动物更敏感，则应选择雄性动物，并予以说明。 4.1.2应选择毒性试验中常采用的动物种属。雌性动物应未孕未产。用于染毒的每一只动物应为成 年动物（8周龄10周龄），体重（200g～300g），且体重应在已染毒动物平均体重的土20%内。动物应 健康、皮肤完整。 4.2饲养条件 动物实验室的温度应保持在20℃～26℃的范围内。相对湿度维持在40%～70%。采用人工照 明，12h明、暗交替。采用常规实验室饲料喂养，自由饮用无菌水（依据GB14925）。 4.3动物准备 4.3.1在开始染毒前至少适应性饲养5d，出于动物福利考虑应使用群体笼养。试验中应随机选择动 物并编号标记。 4.3.2染毒前一天，应仔细去除受试动物背部或侧面的毛（去毛面积至少为体表面积的10%）。按需麻 醉动物，以便在试验操作中易于控制并减少应激反应。应注意避免动物皮肤擦伤（以免改变皮肤渗透 性）。确定去毛和受试物涂覆区域时应考虑动物体重。 4.4试验内容 4.4.1剂量分组 4.4.1.1 受试物应尽可能均匀地涂敷在动物背部及侧面皮肤的去毛区（去毛面积至少为体表面积的 2 GB/T21606—2022 10%）。受试物为高毒时，涂敷表面积可适当减小，但应尽可能使受试物涂抹均匀、覆盖轻薄。在24h 接触期内，应使用多孔纱布覆盖，再用无刺激性胶布固定，确保受试物与皮肤接触。还应以适当方式进 一步覆盖染毒部位，防止纱布脱落并避免动物舔食。必要时，在不影响动物活动的前提下，可使用适当 约束装置。在24h接触期内，可将动物分笼饲养，以避免笼中其他动物舔食受试物 4.4.1.2当受试物为固体时，应将其充分研磨及与适量赋形剂混匀（常使用水，但必要时可选择其他适 的影响，应记录赋形剂的使用量（通常为0.5mL～1mL）。液体受试物一般不需稀释。 4.4.1.3在24h接触期结束时，应用水或其他溶剂去除残余的受试物。除特殊原因（例如，由于严重毒 性作用，与其他动物接触可能会增加痛苦或可加剧局部皮肤反应）外，结束皮肤受试物接触的动物应群 体饲养，尽量减少分笼饲养的时间。 4.4.2动物数量及剂量水平 4.4.2.1在正式试验中，每个剂量组使用2只动物，按照流程依次染毒。通常，急性经皮毒性未知或较 高（例如：LDso<200mg/kg），未达豁免标准，需进行急性经皮毒性试验。 预试验，最大程度地减少实验动物的数量并优化试验设计（依据附录B中毒性剂量范围预试验流程 图）。根据毒性剂量范围预试验的结果，按录C流程图中的试验方案，对另外2只动物进行正