ICS 65.120 B 46 中华人民共和国国家标准 GB/T 6436—2018 代替GB/T6436—2002 饲料中钙的测定 Determinationof calciumin feeds 2018-12-01实施 2018-05-14发布 国家市场监督管理总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T 6436—2018 前言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草 本标准代替GB/T6436—2002《饲料中钙的测定》。 本标准与GB/T6436—2002相比主要技术内容差异如下： 修改了标准的使用范围（见第1章，2002年版的第1章）； 一增加了钙的定量限（见第1章）； 修改了采样和试样制备的方法（见3.4，2002年版的第6章）； 本标准由全国饲料工业标准化技术委员会（SAC/TC76）提出并归口。 本标准起草单位：国粮武汉科学研究设计院有限公司[国家饲料质量监督检验中心（武汉）。 本标准主要起草人：高丽红、王思思、黄婷、王峻、何旭孔。 本标准所代替标准的历次版本发布情况为： GB/T64361992.GB/T6436—2002 1 GB/T 6436—2018 饲料中钙的测定 1范围 本标准适用于饲料原料、配合饲料、浓缩饲料、精料补充料和添加剂预混合饲料中钙的测定 本标准方法的检出限为0.015%，定量限为0.05%。 2规范性引用文件 2 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T601化学试剂滴定分析（容量分析）用标准溶液的制备 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T14699.1饲料采样 GB/T20195动物饲料试样的制备 3高锰酸钾法 3.1原理 将试样中有机物破坏，钙变成溶于水的离子，用草酸铵定量沉淀，用高锰酸钾法间接测定钙含量。 3.2 试剂或材料 除非另有说明，本标准所有试剂均为分析纯和符合GB/T6682规定的三级水。 3.2.1浓硝酸。 3.2.2高氯酸：70%~72%。 3.2.3盐酸溶液（1+3）。 3.2.4 硫酸溶液（1+3）。 3.2.5 氨水溶液（1+1)。 3.2.6 氨水溶液（1+50）。 3.2.7 草酸铵溶液（42g/L)：称取4.2g草酸铵溶于100mL水中。 3.2.8 高锰酸钾标准溶液[c( -KMnO.) )=0.05mol/LJ的配制按GB/T601规定。 3.2.9 甲基红指示剂（1g/L）：称取0.1g甲基红溶于100mL95%乙醇中。 3.2.10 有机微孔滤膜：0.45mm。 3.2.11 定量滤纸：中速，7cm~9cm。 1 GB/T6436—2018 3.3 仪器设备 3.3.1 实验室用样品粉碎机或研钵。 3.3.2 分析天平：感量0.0001g。 3.3.3 高温炉：可控温度在（550士20）℃。 3.3.4埚：瓷质50mL。 3.3.5容量瓶：100mL。 3.3.6滴定管：酸式，25mL或50mL。 3.3.7 玻璃漏斗：直径6cm。 3.3.8 移液管：10mL,20mL。 3.3.9烧杯：200mL。 3.3.10凯氏烧瓶：250mL或500mL。 3.4买 采样和试样制备 按GB/T14699.1的规定，抽取有代表性的饲料样品，用四分法缩减取样，按GB/T20195制备试 样。粉碎至全部过0.45mm孔筛，混匀装于密封容器，备用。 3.5分析步骤 3.5.1试样提取 3.5.1.1干法 称取试样0.5g5g于埚中，精确至0.0001g，在电炉上小心炭化，再放入高温炉于550℃下灼 烧3h，在中加人盐酸溶液（3.2.3)10mL和浓硝酸（3.2.1）数滴，小心煮沸，将此溶液转人100mL容 量瓶中，冷却至室温，用水稀释至刻度，摇匀，为试样分解液。 3.5.1.2湿法 称取试样0.5g~5g于250mL凯氏烧瓶中，精确至0.0002g，加入浓硝酸（3.2.1）10mL，小火加热 煮沸，至二氧化氮黄烟逸尽，冷却后加人高氯酸（3.2.2）10mL，小心煮沸至溶液无色，不得蒸干，冷却后 加水50mL，且煮沸驱逐二氧化氮，冷却后移人100mL容量瓶中，用水定容至刻度，摇匀，为试样分 解液。 警示一小火加热煮沸过程中如果溶液变黑需立刻取下，冷却后补加高氯酸，小心煮沸至溶液无 色；加入高氯酸后，溶液不得蒸干，蒸干可能发生爆炸。 3.5.2测定 准确移取试样分解液10mL~20mL（含钙量20mg左右）于200mL烧杯中，加水100mL，甲基红 指示剂（3.2.9）2滴，滴加氨水溶液（3.2.5）至溶液呈橙色，若滴加过量，可加盐酸溶液（3.2.3）调至橙色， 再多加2滴使其呈粉红色（pH为2.5～3.0），小心煮沸，慢慢滴加热草酸铵溶液（3.2.7)10mL，且不断搅 拌，如溶液变橙色，则应补加盐酸溶液（3.2.3）使其呈红色，煮沸2min～3min，放置过夜使沉淀陈化（或 在水浴上加热2h）。 用定量滤纸过滤，用氨水溶液（3.2.6）洗沉淀6次～8次，至无草酸根离子[接滤液数毫升加硫酸溶 液（3.2.4）数滴，加热至80℃，再加高锰酸钾标准溶液（3.2.8)1滴，呈微红色，且30s不褪色 将沉淀和滤纸转入原烧杯中，加硫酸溶液（3.2.4）10mL，水50mL，加热至75℃~80℃，用高锰酸 GB/T 6436—2018 钾标准溶液（3.2.8）滴定，溶液呈粉红色且30s不褪色为终点。 同时进行空白溶液的测定。 3.6试验数据处理 试样中钙的含量X，以质量分数表示（%），按式（1)计算： (V-V。) XcX 0.02 X 100 ..(1) V' m×100 式中： 试样消耗高锰酸钾标准溶液的体积，单位为毫升（mL）； 空白消耗高锰酸钾标准溶液的体积，单位为毫升（mL）； 高锰酸钾标准溶液的浓度，单位为摩尔每升（mol/L）； -滴定时移取试样分解液体积，单位为毫升（mL）； 试样的质量，单位为克（g）； 0.02与1.00mL高锰酸钾标准溶液[c -KMnO）=1.000mol/L相当的以克表示的钙的 15 质量。 测定结果用平行测定的算术平均值表示，结果保留三位有效数字。 3.7重复性 含钙量10%以上时，在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不大于这两个测定值得 算术平均值的3%； 含钙量在5%10%时，在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不大于这两个测定 值得算术平均值的5%； 含钙量1%~5%时，在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不大于这两个测定值得 算术平均值的9%； 含钙量1%以下时，在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不大于这两个测定值得 算术平均值的18%。 4乙二胺四乙酸二钠络合滴定法 4.1原理 将试样中有机物破坏，钙变成溶于水的离子，用三乙醇胺、乙二胺、盐酸羟胺和淀粉溶液消除干扰离 子的影响，在碱性溶液中以钙黄绿素为指示剂，用乙二胺四乙酸二钠标准滴定溶液络合滴定钙，可快速 测定钙的含量。 4.2试剂或材料 除非另有说明，本标准所有试剂均为分析纯和符合GB/T6682规定的三级水。 4.2.1盐酸羟胺。 4.2.2 三乙醇胺。 4.2.3乙二胺。 4.2.4盐酸溶液（1+3）。 3 GB/T6436—2018 4.2.6淀粉溶液（10g/L）：称取1g可溶性淀粉于200mL烧杯中，加5mL水润湿，加95mL沸水搅 拌，煮沸，冷却备用（现用现配）。 4.2.7孔雀石绿溶液（1g/L）。 4.2.8钙黄绿素一甲基百里香草酚蓝指示剂：0.10g钙黄绿素与0.10g甲基麝香草酚蓝与0.03g百里 香酚酥、5g氯化钟研细混匀，贮存于磨口瓶中备用。 4.2.9钙标准溶液（0.0010g/mL）：称取2.4974g于105℃~110℃干燥3h的基准物碳酸钙，溶于 40mL盐酸溶液（11.4）中，加热赶除二氧化碳，冷却，用水移至1000mL容量瓶中，定容至刻度。 4.2.10乙二胺四乙酸二钠（EDTA）标准滴定溶液：称取3.8gEDTA于200mL烧杯中，加200mL 水，加热溶解冷却后转至1000mL容量瓶中，用水定容至刻度。 4.2.10.1EDTA标准滴定溶液的标定：准确吸取钙标准溶液（4.2.9)10.0mL按试样测定法进行滴定。 4.2.10.2EDTA滴定溶液对钙的滴定度按式（2)计算： T_OXV ....(2) Vo 式中： T——EDTA标准滴定溶液对钙的滴定度，单位为克每毫升（g/mL）； d 钙标准溶液的质量浓度，单位为克每毫升（g/mL）： V—所取钙标准溶液的体积，单位为毫升（mL）； V。——EDTA标准滴定溶液的消耗体积，单位为毫升（mL）。 所得结果应表示至0.0001g/mL。 SAG 4.3 仪器设备 仪器和设备同3.3。 4.4分析步骤 4.4.1试样提取 试样提取同3.5.1。 4.4.2测定 准确移取试样分解液5mL~25mL（含钙量2mg~25mg）。加水50mL，加淀粉溶液（4.2.6） 10mL、三乙醇胺（4.2.2）2mL、乙二胺（4.2.3）1mL、1滴孔雀石绿溶液（4.2.7），滴加氢氧化钾溶液 （4.2.5）至无色，再过量10mL，加0.1g盐酸羟胺（4.2.1)（每加人一种试剂后都需要摇匀），加钙黄绿素 -甲基百里香草酚蓝指示剂（4.2.8）少许，在黑色背景下立即用乙二胺四乙酸二钠（EDTA）标准滴定溶 液（4.2.10）滴定至绿色荧光消失现紫红色且30S不回头为滴定终点。同时做空白实验。 5试验数据处理 4.5 试