ICS 65.120 B 46 GB 中华人民共和国国家标准 GB/T 17818—2010 代替GB/T17818—1999 饲料中维生素D3的测定 高效液相色谱法 Determination of vitamin D3 in feeds- High-performance liquid chromatography 2010-09-26发布 2011-01-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T 17818—2010 前言 本标准代替GB/T17818一1999《饲料中维生素D:的测定 高效液相色谱法》。 本标准与GB/T17818—1999主要差异如下: 增加资料性附录A; 一原标准方法为第一法皂化提取法; 一补充第二法直接提取法,适用于维生素预混料中维生素D的测定。 本标准的附录A为资料性附录。 本标准由全国饲料工业标准化技术委员会(SAC/TC76)提出并归口。 本标准起草单位:中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所[国家饲料质量监督检验中心 (北京)、北京桑普生物化学技术有限公司、广东爱保农科技有限公司、帝斯曼维生素(上海)有限公司、 拜耳(四川)动物保健有限公司。 本标准主要起草人:赵小阳、施文娟、虞哲高、吴革华、李俊玲、李永才、张进、商军、郑秋峰。 本标准所代替标准的历次版本发布情况为: -GB/T17818—1999。 1 GB/T17818—2010 饲料中维生素D3的测定 高效液相色谱法 1范围 本标准规定了饲料中维生素D的高效液相色谱法测定。 本标准第一法适用于配合饲料、浓缩饲料、复合预混合饲料、维生素预混合饲料中维生素D3的测 定,定量限为12.5μg/kg(500IU/kg)。 本标准第二法适用于维生素预混合饲料中维生素D的测定,定量限为125mg/kg(5×10°IU/kg)。 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有 的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。 GB/T603化学试剂试验方法中所用制剂及制品的制备 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T14699.1饲料采样 GB/T20195动物饲料试样的制备 3第一法皂化提取法 3.1原理 用碱溶液皂化试样,乙醚提取维生素D:,蒸发乙醚,残渣溶解于甲醇并将部分溶液注入高效液相色 谱反相净化柱,收集含维生素D淋洗液,蒸发至干,溶解于适当溶剂中,注人高效液相色谱分析柱,在 264nm处测定,外标法计算维生素D,含量。 3.2试剂和溶液 除特殊注明外,本标准所用试剂均为分析纯,水符合GB/T6682中三级用水规定,色谱用水符合 GB/T6682中一级用水规定,溶液按照GB/T603配制。 3.2.1无水乙醚(不含过氧化物) 3.2.1.1过氧化物检查方法:用5mL乙醚加1mL碘化钟溶液(3.2.9),振摇1min,如有过氧化物则 放出游离碘,水层呈黄色,或加淀粉指示液(3.2.10),水层呈蓝色。该乙醚需处理后使用。 3.2.1.2去除过氧化物的方法:乙醚用硫代硫酸钠溶液(3.2.11)振摇,静置,分取乙醚层,再用水振摇, 洗涤两次,重蒸,弃去首尾5%部分,收集馏出的乙醚,再检查过氧化物,应符合规定。 3.2.2无水乙醇。 3.2.3正已烷:色谱纯。 3.2.41,4-二氧六环。 3.2.5甲醇:色谱纯。 3.2.62,6-二叔丁基对甲酚(BHT)。 3.2.7无水硫酸钠。 3.2.8条 氮气(纯度99.9%)。 3. 2. 9 碘化钾溶液:100g/L。 1

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