ICS 65.120 B 46 GB 中华人民共和国国家标准 GB/T25735—2010 饲料添加剂 L-色氨酸 Feed additive-L-Tryptophan 2010-12-23发布 2011-03-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T25735—2010 前言 本标准由全国饲料工业标准化技术委员会（SAC/TC76）提出并归口。 本标准起草单位：中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所[国家饲料质量监督检验中心 （北京）。 本标准主要起草人：王彤、樊霞、贾铮、闫惠文、赵小阳、李兰、董延、高立云、李守申、胡明云。 GB/T25735—2010 饲料添加剂L-色氨酸 1范围 本标准规定了饲料添加剂L-色氨酸产品的要求、试验方法、检验规则及标签、包装、运输和贮存 本标准适用于以微生物发酵生产的饲料添加剂L-色氨酸。 分子式：CH12N202 相对分子质量：204.23（按2007年国际相对原子质量） 结构式： OH N12 规范性引用文件 2 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有 的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T 601 化学试剂 标准滴定溶液的制备 GB/T 602 化学试剂 杂质测定用标准溶液的制备 GB/T 603 化学试剂 试验方法中所用制剂及制品的制备 GB/T 6435 饲料中水分和其他挥发性物质含量的测定 GB/T 6438 饲料中粗灰分的测定 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB10648 饲料标签 GB/T13080 饲料中铅的测定 原子吸收光谱法 GB/T 13081 饲料中汞的测定 GB/T 13082 饲料中镉的测定方法 GB/T 13091 饲料中沙门氏菌的检测方法 GB/T14699.1饲料采样 GB/T18246饲料中氨基酸的测定 《中华人民共和国药典》（2005年版二部） 3要求 3.1性状 白色至微黄色结晶或结晶性粉末，无嗅或略有气味，略溶于水，溶于热乙醇和氢氧化钠溶液。 3.2鉴别 3.2.1氨基酸定性鉴别 试样的水溶液与三酮溶液反应，溶液呈红紫色。 3.2.2色氨酸定性鉴别 按GB/T18246测定，要求试样溶液色氨酸色谱峰保留时间与标准溶液相同，且测定含量在98%土 1 GB/T25735—2010 2%~98%±3%之内。 3.2.3比旋光度法 试样的水溶液经旋光仪测定，其测定值在一29.0°～一32.8°之间。 3. 3 技术指标 技术指标应符合表1规定。 表1技术指标 项 目 指 标 含量（以CnH12NO2计）（干基）/% ≥98.0 干燥失重/% ≤0.5 粗灰分/% 0.5 比旋光度[a]s 29.0°~-32.8° pH（1%水溶液） 5.0~7.0 /(mg/kg) ≤2 铅/(mg/kg) <5 镉/(mg/kg) ≤2 汞/(mg/kg) 0.1 沙门氏菌（25g样品中） 不得检出 试验方法 4 除特殊说明外，所用试剂均为分析纯，实验用水符合GB/T6682中三级用水规定，试剂和溶液的制 备应符合GB/T601，GB/T602和GB/T603的规定。 4.1试剂和溶液 4.1.1节三酮溶液：1g/L水溶液 4.1.2 色氨酸标准品：色氨酸含量≥99.0%。 4.1.3 色氨酸标准溶液（100nmol/mL）：称取色氨酸标准品0.0510g（精确至0.0001g），加水溶解 （加1滴10%氢氧化钠溶液）并定容至50mL，取该溶液1mL，用水定容至50mL。 4. 1. 4 甲酸。 4. 1.5 冰乙酸。 4. 1. 6 高氯酸标准溶液：c（HCIO,）=0.1mol/L。 4. 1.7 α-萘酚苯基甲醇指示剂：2g/L冰乙酸溶液。 4. 2 仪器和设备 除实验室常用设备以外，还需要以下仪器和设备： 4.2.1 氨基酸分析仪。 4. 2. 2 电位滴定仪。 4.2.3 电极：饱和甘汞电极及玻璃电极。 4.2.4酸度计。 4.3鉴别试验 4.3.1性状 在自然光条件下，通过目测，产品为白色至微黄色结晶或结晶性粉末；打开产品包装，部分产品在嗅 觉上感觉无味道，部分产品略有气味；取少量试样，分别溶于水、热乙醇和氢氧化钠溶液中，结果显示试 2 GB/T25735—2010 样略溶于水，能完全溶解于热乙醇和氢氧化钠溶液。 4.3.2氨基酸定性鉴别 称取试样0.1g，溶于100mL水中，取该溶液5mL，加1mL节三酮溶液（4.1.1），置沸水浴反应 3min，溶液呈红紫色。 4.3.3色氨酸定性鉴别 称取试样0.0510g（精确至0.0001g），加水溶解（加1滴10%氢氧化钠溶液）并定容至50mL，取 该溶液1mL，用水定容至50mL。 按GB/T18246测定，要求试样溶液色氨酸色谱峰保留时间与色氨酸标准溶液（4.1.3）相同，且测 定含量在98%±2%~98%±3%之内。 4.3.4比旋光度法 试样在105℃干燥至恒重，称取干燥试样0.5g（精确至0.0001g），加入30mL水，稍加热溶解，全 部转人50mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。以下按照《中华人民共和国药典》（2005年版二部） 测定。 4.4L-色氨酸含量的测定 4.4.1测定方法 称取0.25g（精确至0.0001g）干燥至恒重的试样于干燥的100mL烧杯或锥形瓶中，加入3ml 甲酸（4.1.4），待试样完全溶解后加人50mL冰乙酸（4.1.5），将电极插人溶液中，调节搅拌速度至溶液 充分涡旋，按仪器说明书调整仪器参数，用高氯酸标准溶液（4.1.6）进行电位滴定，以电位值突变作为滴 定终点。如选择指示剂法，加人10滴α-萘酚苯基甲醇指示剂（4.1.7），用高氯酸标准溶液进行滴定，试 样液由橙黄色变为黄绿色即为滴定终点。 同时做空白试验。 4.4.2结果计算 L-色氨酸（CnH12N,O）含量X以质量分数（%）表示，按式（1)计算： .(1) m×1000 式中： Vi—试样消耗高氯酸标准溶液体积，单位为毫升（mL）； V。一一空白试验消耗高氯酸标准溶液体积，单位为毫升（mL）； 高氯酸标准溶液浓度，单位为摩尔每升（mol/L）； m——试样质量，单位为克(g)； 204.23—L-色氨酸的摩尔质量，单位为克每摩尔（g/mol）。 平行测定结果用算术平均值表示，保留三位有效数字。 4.4.3重复性 同一分析者对同一试样同时进行两次平行测定的结果相差应不大于0.5%。 4.5干燥失重的测定 按GB/T6435测定。 4.6粗灰分的测定 按GB/T6438测定。 4.7比旋光度的测定 按4.3.4测定。 4.8pH值的测定 称取试样0.5g（精确至0.01g）加人30mL水，稍加热溶解，定量地转人50mL容量瓶中，待溶液 3