ICS11.100 CCSC44 CASME 中国中小商业企业协会团体标准 T/CASME747—2023 人类HER2基因扩增检测试剂盒（荧光原位 杂交法） HumanHER2geneamplificationdetectionkit（fluorescenceinsituhybridization） 2023-09-22发布 2023-09-30实施 中国中小商业企业协会  发布 全国团体标准信息平台 T/CASME747—2023 I目次 前言..................................................................................II 引言.................................................................................III 1范围................................................................................1 2规范性引用文件......................................................................1 3术语和定义..........................................................................1 4要求................................................................................1 5试验方法............................................................................2 6标识、标签、使用说明书..............................................................3 7包装、运输和贮存....................................................................4 全国团体标准信息平台 T/CASME747—2023 II前言 本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件由武汉康录生物技术股份有限公司提出。 本文件由中国中小商业企业协会归口。 本文件起草单位：武汉康录生物技术股份有限公司、宝日医生物技术（北京）有限公司、赛默飞世 尔（苏州）仪器有限公司、宝生物工程（大连）有限公司、生工生物工程（上海）股份有限公司。 本文件主要起草人：孙华、付杰、陈刚、于福功、初腾。 全国团体标准信息平台 T/CASME747—2023 III引言 本文件的发布机构提请注意，声明符合本文件时，可能涉及3.2相关定义中(CN201310260373.8) 《一种用于检测Her2基因不含重复序列的FISH探针、试剂盒及其检测方法》相关专利的使用。 本文件的发布机构对于该专利的真实性、有效性和范围无任何立场。 该专利持有人已向本文件的发布机构承诺，同意在公平、合理、无歧视基础上，免费许可任何单 位或者个人在实施该标准时实施其专利。该专利持有人的声明已在本文件的发布机构备案。相关信息可 以通过以下联系方式获得： 专利持有人姓名：武汉康录生物技术股份有限公司。 地址：武汉东湖新技术开发区高科园三路9号武汉光谷精准医疗产业基地一期（全部自用）8号厂 房1-4层（1）厂房号 请注意除上述专利外，本文件的某些内容仍可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的 责任。 全国团体标准信息平台 T/CASME747—2023 1人类HER2基因扩增检测试剂盒（荧光原位杂交法） 1范围 本文件规定了人类HER2基因扩增检测试剂盒（荧光原位杂交法）的术语和定义、要求、试验方法、 标志、标签、使用说明以及包装、运输和贮存。 本文件适用于检测HER2基因扩增、不含重复序列的荧光原位杂交探针试剂盒（以下简称试剂盒） 的生产和检验。 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB/T191包装储运图示标志 YY/T0466.1医疗器械用于医疗器械标签、标记和提供信息的符号第1部分：通用要求 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 荧光原位杂交法fluorescentinsituhybridization;FISH 根据碱基互补配对的原则，在与目标DNA配对的核酸片断（探针）上标记荧光染料，该探针与待 检材料中相应的核酸片断在一定条件下特异结合（杂交），形成双链核酸，借助于荧光显微镜观察并记 录形成杂交双链的类型、数量，从而判断待检样本中目标DNA正常与否的检测方法。 3.2 人类HER2基因扩增检测试剂盒（荧光原位杂交法）HumanHER2geneamplificationdetectionkit 由HER2基因位点不含重复序列的荧光原位杂交探针及17号染色体着丝粒特异性探针组成，通过 检测样本中HER2基因位点的异常情况，用于辅助判断与HER2基因相关的肿瘤并在治疗过程中指导临 床用药的试剂盒。 3.3 HER2HumanEpidermalGrowthFactorReceptor2 分子量为185kD、具酪氨酸激酶活性的跨膜蛋白，其编码基因定位于人染色体17q12，是表皮生长 因子受体家族的成员。 4要求 4.1外观 试剂盒的外观应符合表1的要求。 表1外观要求 项目 要求 外包装 干净无污渍，完整无破损 内装物 试剂无泄漏 性状 液体 标示 齐全，清晰 全国团体标准信息平台 T/CASME747—2023 24.2荧光信号强度 探针在与中期分裂外周血（或其培养液）淋巴细胞制成的对照片和乳腺/癌组织切片杂交后，在荧 光显微镜下，均应发出可被肉眼识别的荧光信号。 4.3探针质量 4.3.1条件 在外周血（或其培养液）淋巴细胞制成的对照片处于中期分裂相的细胞上进行。 4.3.2探针敏感性 分析50个处于中期分裂相的细胞的100条17号染色体，至少有98条显示1个着丝粒标记的 信号和一个HER2基因位点标记的荧光信号。 4.3.3探针特异性 分析50个处于中期分裂相的细胞的100条17号染色体，至少有98条染色体在着丝粒和 HER2基因位点区域显示各自特定的荧光信号。 4.4探针有效性判断 4.4.1条件 在（乳腺/癌）组织切片上进行。 4.4.2阳性符合率 检测至少4例阳性（乳腺/癌）组织切片，分析每例样本的两种不同荧光信号数目，其结果应符合 异常结果（阳性）判断标准，判为阳性。 4.4.3阴性符合率 检测至少4例阴性（乳腺/癌）组织切片，分析每例样本的两种不同荧光信号数目，其结果应符合 正常结果（阴性）判断标准，判为阴性。 4.4.4判断标准 4.4.4.1HER2基因扩增阳性： a)Ratio≥2.0时，可认为该组织为HER2基因扩增阳性。 b)Ratio＜2.0时，但HER2基因拷贝数/细胞数≥6.0时也为HER2基因扩增阳性。 4.4.4.2HER2基因扩增阴性： Ratio＜2.0且HER2基因拷贝数/细胞数＜4.0时为HER2基因扩增阴性。 4.4.4.3HER2基因扩增状态不稳定： a)Ratio＜2.0,4.0≤HER2基因拷贝数/细胞数＜6.0时为HER2基因扩增结果不确定。 b)对于结果不确定的病例，需要再计数20个细胞核中的信号，两次计数结果累加计算，或由另 外一位分析者重新计数。如仍为临界值，则应行免疫组化检测（若FISH前未行），也可以选 取不同的组织块重新检测。 5试验方法 5.1外观 在自然光下目视检查。 5.2荧光信号强度 探针在与外周血（或其培养液）淋巴细胞制成的对照片和乳腺/癌组织切片杂交后，在配有相应滤 片组的荧光显微镜（100倍物镜，10倍目镜）下观察，均应发出可被肉眼识别的荧光信号。 全国团体标准信息平台 T/CASME747—2023 35.3探针质量 5.3.1探针敏感性 探针与外周血（或其培养液）淋巴细胞制成的对照片杂交后，在配有相应滤片组的荧光显微镜（100 倍物镜，10倍目镜）下观察，分析50个中期分裂相细胞，结果应符合4.3.2的规定。 注：17号染色体较小，为亚中央着丝粒染色体，短臂较短；HER2基因位点位于长臂近着丝粒端（1区2带17q12）。 5.3.2探针特异性 探针与外周血（或其培养液）淋巴细胞制成的对照片杂交后，在配有相应滤片组的荧光显微镜（100 倍物镜，10倍目镜）下观察，分析50个中期分裂相细胞，结果应符合4.3.3的规定。 5.4有效性 5.4.1阳性符合率 探针与阳性（乳腺/癌）组织切片细胞杂交后，镜下观察，每例样本均分析规定的数量的细胞，其 结果应符合异常结果（阳性）判断标准。 5.4.2阴性符合率 探针与阴性（乳腺/癌）组织切片细胞杂交后，镜下观察，每例样本均分析规定的数量的细胞，其 结果应符合正常结果（阴性）判断标准。 6标识、标签、使用说明书 6.1外包装标识、标签 应符合YY/T0466.1的要求，且至少应包含如下内容： c)产品名称及包装规格； d)生产企业或售后服务单位的名称、地址、联系方式； e)医疗器械注册证书编号； f)产品标准