ICS 65.020 B 16 DB13 河 北 省 地 方 标 准 DB 13/T 2754—2018 山楂叶螨检疫鉴定方法 2018 - 07 - 16 发布 河北省质量技术监督局 2018 - 08 - 16 实施 发 布 DB13/T 2754—2018 前 言 本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 本标准由河北出入境检验检疫局提出。 本标准起草单位：河北出入境检验检疫局检验检疫技术中心，河北省森林病虫害防治检疫站，北 京市海淀区农业执法大队。 本标准主要起草人：娄巧哲、李静、王建昌、孙晓霞、任卫红、周长青、项佳林、胡连霞、崔佳 玉、谷青。 I DB13/T 2754—2018 山楂叶螨检疫鉴定方法 1 范围 本标准规定了山楂叶螨Amphitetranychus viennensis (Zacher)的检疫鉴定方法。 本标准适用于植物及其产品中山楂叶螨的检疫和鉴定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 28069-2011 根螨检疫鉴定方法 SN/T 1148-2002 植物检疫 木薯单爪螨检疫鉴定方法 3 术语和定义 GB/T 28069和SN/T 1148界定的术语和定义适用于本文件。 3.1 双毛 duplex setae 为叶螨科多数种类足I、II跗节具有的特殊结构，由两根基部紧靠在一起的刚毛组成，一般端侧的 一根为感毛， 粗而长， 也称为大毛 （macrochaeta），基侧的一根为触毛，细小，也称为小毛（microchaeta） 。 足I跗节一般具2对双毛，端侧的一对称为前双毛或端侧双毛，基侧的一对称为后双毛或基侧双毛。 3.2 感毛 sensory seta 分布在须肢跗节或各足的跗节和胫节，为化学物质的受纳器。细长或粗短，或特化成柱形、纺锤 形、刺状等，末端圆钝，壁薄，光滑无毛。须肢跗节基部的1根感毛多呈梭形或小枝状，称为背感器， 亚端部的2根呈刺状，端部的感毛通常发达，呈柱形、锥形等，称为端感器。 3.3 骶毛 sacral seta 末体前部按横向排列的二对刚毛，外侧的一对称为外骶毛，内侧的称为内骶毛。 3.4 肛侧毛 para-anal seta 肛门两侧着生的肛毛外侧的1～2对毛。 3.5 1 DB13/T 2754—2018 生殖盖 genital flap 叶螨科生殖孔四周具有放射状的、深刻的表皮皱褶，其前部呈半圆形的、比较光滑的为生殖盖。 3.6 阳具 aedeagus 为叶螨的雄性外生殖器，一般是比较坚硬的、高度几丁质化的构造，其形状多种多样。当螨体侧 面封固时，阳具的形状才可表现完整。结构分为柄部（shaft）和钩部（hook），钩部有时膨大形成端 锤（terminal knob）。 4 山楂叶螨的基本信息 学名：Amphitetranychus viennensis (Zacher) 中文名：山楂叶螨，又名山楂双叶螨 英文名：hawthorn spider mite 分类地位：蛛形纲（Arachnida）、蜱螨亚纲（Acari）、真螨目（Acariformes）、叶螨科 （Tetranychidae）、双叶螨属（Amphitetranychus）。 山楂叶螨主要危害寄主植物的叶片，在叶片反面吐丝结网，在丝网下取食，发生数量大时也在叶 片正面为害，叶片受害部位呈灰黄色斑点，严重时逐渐扩大，致使叶片枯焦，造成早期落叶，严重影 响果实的产量和质量。山楂叶螨主要分布在包含中国（东北、西北、华北、华南等地）在内的亚洲、 欧洲、北美洲、大洋洲的多个国家和地区，是危害苹果、梨、桃、山楂、海棠、杨树、木槿等多种植 物的重要害虫。（参见附录A） 5 方法原理 根据山楂叶螨的分布、寄主及危害状、生物学特性进行寄主检查，依据成螨的形态特征进行种类 鉴定。 6 器材和试剂 6.1 器材与用具 放大镜、体视显微镜、生物显微镜、测微尺、离心管、自封袋、酒精灯、镊子、滤纸、解剖针、 吸管、小毛笔、载玻片、盖玻片、标签、烘箱。 6.2 试剂及配置 6.2.1 乙醇-甘油保存液 70 %乙醇和甘油以50：1的体积比配置而成。 6.2.2 霍氏封固液 30 g 阿拉伯胶，200g 水合三氯乙醛，20g 甘油，50m l蒸馏水；配制时，按上述比例使阿拉伯胶 溶于蒸馏水中，至完全溶解后，置40℃～50℃的水浴加热，加入水合三氯乙醛，搅拌至溶解，加人甘 油，最后用抽气漏斗过滤。 2 DB13/T 2754—2018 6.2.3 埃蔡氏封固液 在 10 g聚乙烯醇中加入40 mL～60 mL蒸馏水，置100℃水浴上加热，搅拌至完全溶解。再加入85%～ 92%的乳酸35 mL和10 mL甘油，搅拌均匀。冷却至微温后，加入1.5%的苯酚水溶液25 mL和20 g水合三 氯乙醛，最后过滤。 7 寄主检查 对可能感染山楂叶螨的植物及其产品进行检查，重点检查茎干粗翘皮下、芽、幼茎、幼叶、老叶、 果洼等处，在现场用放大镜仔细查找，特别检查结有丝网造成卷曲、有黄色斑点、褪绿、变形、变黑 等症状的植物器官，如发现疑似虫体，用小毛笔挑起放入装有乙醇-甘油保存液的离心管中，或连同寄 主植物或部分器官、组织一起置于自封袋中，贴好信息标签，带回实验室镜检。 8 标本制作 先在洁净的载玻片中央滴一滴霍氏封固液或埃蔡氏封固液（二者可任选一种），用吸管从乙醇甘油保存液中吸取成螨至滤纸上，用蘸有封固液的解剖针从滤纸上迅速粘取螨虫标本至封固液中，也 可直接取活螨于封固液中，盖上盖玻片；用镊子夹取载玻片放于酒精灯外焰上加热，至胶液沸腾后立 刻离开，让螨虫虫体完全伸展，玻片置40℃～50℃烘箱干燥，玻片制成后置生物显微镜观察鉴定，并 在盖玻片左侧粘贴记录标签，注明标本号、寄主植物、采集（截获）时间、采集地点（原产地）、采 集人等信息。 9 形态鉴定 9.1 鉴定方法 使用生物显微镜观察玻片标本的形态特征，使用目镜测微尺或摄像软件中的测量工具测量长、宽 等。 9.2 双叶螨属形态鉴定特征 双叶螨属具有以下形态特征（参见附录B）： ——背毛细长，共26根，不着生于突起上，其长度超过横列间距； ——气门沟末端呈网状； ——足I跗节具2对双毛，彼此远离。爪间突缺少背中毛； ——生殖盖表皮纹横向，生殖盖前区表皮纹纵向； ——末体具肛侧毛1对； ——雄螨阳具弯向背面。 9.3 山楂叶螨形态鉴定特征 9.3.1 雌螨 山楂叶螨雌螨具有以下形态特征（参见附录B和附录C）： ——体长（含喙）0.54～0.59 mm，体宽0.28～0.36mm，椭圆形，深红色，足及颚体部分桔黄色， 越冬雌螨桔红色； 3 DB13/T 2754—2018 ——须肢端感器短锥形，其长度与基部宽度略等，背感器小枝状，其长略短于端感器； ——气门沟末端呈网状； ——后半体背表皮纹均为横向，不构成菱形图形。背毛正常； ——足I跗节爪间突裂开为3对针状毛。足I跗节双毛近基侧有4根触毛和1根感毛，其中1根感毛位 于基侧双毛的同一水平线，端侧双毛的腹面有2根触毛；胫节有9根触毛和1根感毛。足II跗节双毛近基 侧有2根触毛和1根感毛，另1触毛在双毛近旁，双毛腹面有2根触毛；胫节有6根触毛。足III、IV跗节 各有9根触毛和1根感毛；胫节各有6根和7根触毛。 9.3.2 雄螨 山楂叶螨雄螨具有以下形态特征（参见附录B和附录C）： ——体长（含喙）约0.43 mm，体宽约0.20 mm。体色桔黄； ——须肢端感器短锥形，但较雌螨细小，背感器略长于端感器； ——足I跗节爪间突呈1对粗壮的刺毛，其背腹面各具1对纤细的针状毛。足II～IV爪间突同雌螨。 足I跗节双毛近基侧有4根触毛和3根感毛，其中1根感毛与基侧双毛位于同一水平，端侧双毛的腹面有2 根触毛；胫节有9根触毛和4根感毛。足II跗节双毛近基侧有3根触毛和1根感毛，双毛腹面有2根触毛； 胫节有6根触毛。足III、IV跗节和胫节毛数同雌螨； ——阳具末端与柄部呈直角弯向背面，形成与柄部垂直的端锤，其近侧突起短小，尖利，远侧突 起向背面延伸，其端部逐渐尖细。 9.3.3 卵 直径0.16 mm。圆球形，春季产卵呈橙黄色，夏季产的卵呈黄白色。 9.3.4 幼螨 3对足。初孵幼螨体长0.16 mm，体圆形、黄白色，取食后卵圆形浅绿色，体背两侧出现深绿长斑。 9.3.5 若螨 4对足。前期若螨体背开始出现刚毛，两侧有明显墨绿色斑，后期若螨体较大，体形似成螨，但无 生殖孔可与成螨区别。 10 结果判定 以成螨鉴定特征为依据，其他特征作参考，符合9.3.1或9.3.2的描述即可鉴定为山楂叶螨。 11 标本保存 玻片右侧粘贴定名标签，注明鉴定结果（学名、中文名、鉴定人和鉴定日期），移入标本柜中保 存，以备复检。 4 DB13/T 2754—2018 AA 附 录 A （资料性附录） 山楂叶螨的地理分布、寄主和生物学特性 A.1 地理分布 黑龙江、吉林、辽宁、内蒙古、陕西、宁夏、甘肃、青海、新疆、西藏、北京、山东、山西、河 北、河南、江苏、安徽、浙江、福建、湖北、湖南、江西、广东、广西、四川、云南、香港、台湾； 日本，朝鲜，韩国，乌兹别克斯坦，巴基斯坦，伊朗，土耳其，阿塞拜疆，格鲁吉亚，奥地利，保加 利亚，波兰，德国，罗马尼亚，葡萄牙，瑞典，乌克兰，西班牙，英国，俄罗斯，美国，澳大利亚。 A.2 寄主 科 属或种 加拿大唐棣Amelanchier canadensis，山桃Amygdalus davidiana，木瓜属Chaenomeles sp.， Crataegus azarolus，Crataegus monogyna，山楂Crataegus pinnatifida，草莓属Fragaria sp.，草莓 Fragaria ananassa ， Malus fomestica ，楸子 Malus prunifolia ，苹果 Malus pumila，变叶海棠Malus toringo ，欧揸属Mespilus sp.，杏Prunus armeniaca ，欧洲甜 樱桃Prunus avium ，钟花樱桃Prunus campanulata，樱桃李Prunus cerasifera，欧洲酸 蔷薇科Rosaceae 樱桃Prunus cerasus，Prunus divaricata，欧洲李Prunus domestica，欧洲酸樱桃Prunus cerasus，Prunus divaricata，欧洲李Prunus domestica，扁桃Prunus dulcis，梅Prunus mume，桃Prunus persica，樱桃Prunus