(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210920068.6 (22)申请日 2022.08.01 (71)申请人 北京悦康科创医药 科技股份有限公 司 地址 100176 北京市大兴区经济技 术开发 区科创七街1 1号院3号楼1层101室 (72)发明人 宋更申　李赛雷　王瑞强　 (74)专利代理 机构 北京卓爱普专利代理事务所 (特殊普通 合伙) 11920 专利代理师 王玉松 (51)Int.Cl. G01N 30/02(2006.01) G01N 30/72(2006.01) G01N 30/86(2006.01) (54)发明名称 一种头孢呋辛钠中基因毒性杂质的检测方 法 (57)摘要 本发明属于药物检测技术领域， 具体涉及一 种同时测定头孢呋辛钠中多种基因毒性杂质的 检测方法。 该方法取头孢呋辛钠原料药配制供试 品溶液， 进行液相色谱和质谱联用检测， 可以同 时准确分离检测多种潜在基因毒性杂质的残留 量， 所述检测方法定量限和检出限低， 专属性和 重复性良好。 权利要求书4页 说明书21页 附图5页 CN 115389653 A 2022.11.25 CN 115389653 A 1.一种头孢呋辛钠基因毒性杂质的检测方法， 所述检测方法包括如下步骤： 1)供试品溶液的配制： 称取头孢呋辛钠， 加入 稀释剂配制成供 试品溶液； 所述稀释剂包括甲酸水 溶液和甲醇； 2)取上述供试品溶液， 注入液相色谱和质谱联用仪中， 采用如下 条件进行检测； 液相条件 包括： 色谱柱， ZORBAX  Eclipse PlusC18； 流动相A， 0.0 5％的甲酸水溶液； 流动相B， 甲醇； 质谱条件 包括： 离子源： ESI 正离子模式； 采集方式为： MRM多反应 检测扫描； 在步骤2)中， 所述杂质的定量信息为下表中的一种或多种： 名称 Q1Mass Q3Mass Frag(V) CE(V) 氨基甲酸甲酯 77.9～78.3 58.9～59.3 55～6525～35 氨基甲酸乙酯 89.9～90.3 61.9～62.3 55～6525～35 氨基甲酸异丙酯 103.9～104.3 44.0～44.4 55～6525～35 氨基磺酸乙酯 123.6～124.0 77.9～78.3 55～6525～35 氨基磺酸异丙酯 137.7～138.1 77.7～78.1 55～6525～35 优选的， 在步骤2)中， 所述杂质的定量信息为下表中的一种或多种： 名称 Q1Mass Q3Mass Frag(V) CE(V) 氨基甲酸甲酯 78.1 59.1 60 30 氨基甲酸乙酯 90.1 62.1 60 30 氨基甲酸异丙酯 104.1 44.2 60 30 氨基磺酸乙酯 123.8 78.1 60 30 氨基磺酸异丙酯 137.9 77.9 60 30 。 2.根据权利要求1所述的检测方法， 其中， 所述头孢呋辛钠基因毒性杂质为氨基甲酸甲 酯、 氨基甲酸乙酯、 氨基甲酸异丙酯、 氨基磺酸乙酯、 氨基磺酸异丙酯中的一种或多种。 3.根据权利要求1所述的检测方法， 其中， 甲酸水溶液和甲醇二者体积比为0.05％的甲 酸水溶液： 甲醇＝1～ 2： 1； 优选的， 0.0 5％的甲酸水溶液： 甲醇＝1:1。 4.根据权利要求1或3所述的检测方法， 其中， 甲酸水 溶液浓度为0.0 5％。 5.根据权利要求1所述的检测方法， 其中， 所述 流动相为梯度洗脱， 运行时间为25mi n。 6.根据权利要求1或5所述的检测方法， 其中， 所述液相条件中， 流动相的洗脱梯度为： 时间(min) 流动相A(％) 流动相B(％) 0.0 88～92 8～12 5.0 90 10 10.0 75 25 15.0 75 25 20.0 90 10 25.0 90 10权　利　要　求　书 1/4 页 2 CN 115389653 A 2。 7.根据权利要求1、 5或6所述的检测方法， 其中， 所述液相条件中， 流动相的洗脱梯度 为： 时间(min) 流动相A(％) 流动相B(％) 0.0 90 10 5.0 90 10 10.0 75 25 15.0 75 25 20.0 90 10 25.0 90 10 。 8.根据权利要求1所述的检测方法， 其中， 所述液相色谱和质谱联用仪为液相色谱和质 谱联用仪(HPLC ‑MS/MS)， 质谱质量分析器为 三重四级杆(MS/ MS)， 质谱检测器为ESI检测器。 9.根据权利要求1所述的检测方法， 其 中， 所述液相条件中， 柱温35℃， 流速0.2mL/min， 进样量5 μL。 10.根据权利要求1所述的检测方法， 其中， 所述质谱条件进一 步包括以下： 极性 positive 毛细管电压 capillary(V) 2500 气体温度Gas  Temp(℃) 300 气体流速Gas  Flow(L/min) 4 雾化器Nebul izer(psi) 40 鞘气温度Sheath  Gas Heater(℃) 280 鞘气流速Sheath  Gas Flow(L/min) 10 。 11.一种基因毒性杂质的检测方法， 所述检测方法包括如下步骤： 1)供试品溶液的配制： 取基因毒性杂质或者可能含有该基因毒性杂质的供试品， 加入 稀释剂配制成待测溶 液； 所述基因毒性杂质为氨基甲酸甲酯、 氨基甲酸乙酯、 氨基甲酸异丙酯、 氨基磺酸乙酯、 氨基磺酸异丙酯中的一种或多种； 所述稀释剂包括甲酸水 溶液和甲醇； 2)取上述待测溶 液， 注入液相色谱和质谱联用仪中， 采用如下 条件进行检测； 液相条件 包括： 色谱柱， ZORBAX  Eclipse PlusC18； 流动相A， 0.0 5％的甲酸水溶液； 流动相B， 甲醇； 质谱条件 包括： 离子源： ESI 正离子模式； 采集方式为： MRM多反应 检测扫描； 在步骤2)中， 所述杂质的定量信息为下表中的一种或多种： 名称 Q1Mass Q3Mass Frag(V) CE(V)权　利　要　求　书 2/4 页 3 CN 115389653 A 3