(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210950855.5 (22)申请日 2022.08.09 (71)申请人 上海和黄药业有限公司 地址 201401 上海市奉贤区肖业路38 8号 (72)发明人 谢元彪　高婷婷　王玲　曾亚文　 李淞明　詹常森　张正光　 (74)专利代理 机构 上海光华专利事务所(普通 合伙) 31219 专利代理师 许亦琳　余明伟 (51)Int.Cl. G01N 30/02(2006.01) (54)发明名称 一种开心散中多指标成分含量的检测方法 (57)摘要 本发明提供一种开心散中多指标成分含量 的检测方法， 包括： 将开心散加入溶剂溶解后超 声提取、 摇匀、 过滤， 取续滤液获得的供试品溶液 采用超高效液相色谱法进行检测， 确定供试品溶 液中5种指标成分： 远志口山酮 Ⅲ、 3,6’ ‑二芥子 酰基蔗糖、 人参皂苷Rg1、 茯苓酸、 去氢茯苓酸的 含量。 本发 明提供的一种开心散中多指标成分含 量的检测方法， 精密度、 重现性、 稳定性良好， 结 果准确、 可靠， 可真实反映开心散中多种指标成 分的质量差异， 完 善药物制剂的质量控制体系。 权利要求书2页 说明书11页 附图5页 CN 115267005 A 2022.11.01 CN 115267005 A 1.一种开心散中多指标成分含量的检测方法， 包括： 将开心散加入溶剂溶解后超声提 取、 摇匀、 过滤， 取续滤液获得的供试品溶液采用超高效液相色谱法进行检测， 确定供试品 溶液中5种指标成分： 远志口山酮 Ⅲ、 3,6’ ‑二芥子酰基蔗糖、 人参皂苷Rg1、 茯苓酸、 去氢茯 苓酸的含量。 2.根据权利要求1所述的一种开心散中多指标成分含量的检测方法， 其特征在于， 包括 以下条件中任一项或多 项： A1)所述溶剂选自甲醇、 70％甲醇、 乙醇或70％乙醇中的一种或多种组合； A2)所述开心散加入的质量与溶剂加入的体积之比为1～5:3 0， g/mL； A3)所述超声提取的时间为10～5 0分钟； A4)所述超声提取后要 进去冷却。 3.根据权利要求1所述的一种开心散中多指标成分含量的检测方法， 其特征在于， 所述 采用超高效液相色谱法进行检测， 包括以下步骤： 1)配制对照品溶液： 将远志口山酮 Ⅲ、 3,6’ ‑二芥子酰基蔗 糖、 人参皂苷Rg1、 茯苓酸、 去 氢茯苓酸的对照品， 加入溶剂溶解并定容， 配成对照品溶 液； 2)样品检测： 采用超高效液相 色谱法分别检测供试品溶液和步骤1)中的对照品溶液， 比较保留时间进行定性， 采用外标法进行定量， 确 定供试品溶液中远志口山酮 Ⅲ、 3,6’ ‑二 芥子酰基蔗糖、 人参皂苷Rg1、 茯苓酸、 去氢茯苓酸的含量。 4.根据权利要求3所述的一种开心散中多指标成分含量的检测方法， 其特征在于， 步骤 1)中， 所述对照品溶液中远志口山酮 Ⅲ的含量范 围为0.0013～0.04mg/mL， 3,6 ’ ‑二芥子酰 基蔗糖的含量范围为0.01～0.6mg/mL， 人参皂苷Rg1的含量范围为0.006～0.2mg/mL、 茯苓 酸的含量范围为0.0 03～0.09mg/mL、 去氢茯苓酸的含量范围为0.0 01～0.04mg/mL。 5.根据权利要求3所述的一种开心散中多指标成分含量的检测方法， 其特征在于， 步骤 1)中， 所述溶剂选自甲醇、 70％甲醇、 乙醇或70％乙醇中的一种或多种组合。 6.根据权利要求3所述的一种开心散中多指标成分含量的检测方法， 其特征在于， 步骤 2)中， 所述超高效液相色谱法 的检测条件为： 检测器为二极管阵列检测器； 色谱柱为C18色 谱柱； 采用多波长检测， 所述多波长检测的波长范围为202～321nm； 流动相为乙腈 ‑0.05～ 0.15％磷酸水溶液， 其中， A相为乙腈， B相为0.05～0.15％磷酸水溶液； 分析时间为60min； 梯度洗脱。 7.根据权利要求6所述的一种开心散中多指标成分含量的检测方法， 其特征在于， 所述 多波长检测的波长分别为202 ～204nm、 209～211nm、 241～ 243nm、 319 ～321nm。 8.根据权利要求6所述的一种开心散中多指标成分含量的检测方法， 其特征在于， 所述 梯度洗脱的具体程序为： 0～5min， A相： B相体积比为10： 90 ‑14： 86； 5～12min， A相： B相体积比为14： 86 ‑17： 83； 12～17min， A相： B相体积比为17： 83 ‑19： 81； 17～22min， A相： B相体积比为19： 81 ‑21： 79； 22～29min， A相： B相体积比为21： 79 ‑24： 76； 29～34min， A相： B相体积比为24： 76 ‑36： 64； 34～38mi n， A相： B相体积比为3 6： 64‑38： 62；权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115267005 A 238～42mi n， A相： B相体积比为38： 62 ‑42： 58； 42～47min， A相： B相体积比为 42： 58‑60： 40； 47～51mi n， A相： B相体积比为6 0： 40‑70： 30； 51～57mi n， A相： B相体积比为70： 3 0‑73： 27； 57～60min， A相： B相体积比为73： 27 ‑95： 5。 9.根据权利要求3所述的一种开心散中多指标成分含量的检测方法， 其特征在于， 步骤 2)中， 所述超高效液相色谱法 的检测条件还包括有： 所述超高效液相色谱法中柱温为28～ 40℃； 和/或， 所述超高效液相色谱法中的流速为0.1～0.5mL/min； 和/或， 所述超 高效液相 色谱法中的进样量 为1～5 μL。 10.根据权利要求1 ‑9任一所述的一种开心散中多指标成分含量的检测方法在开心散 的质量检测中的用途。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115267005 A 3