ICS65.020.20 CCSB21DB5307 丽江市地方标准 DB5307/T50—2023 丽薯系列马铃薯原原种生产技术规程 TechnicalProceduresofOrignalSeedProductionofPotatoLishuSeries 2023-10-10发布 2023-11-10实施 丽江市市场监督管理局  发布 DB5307/T50—2023 I前言 本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件由丽江市农业科学研究所提出。 本文件由丽江市农业农村局归口。 本文件起草单位：丽江市农业科学研究所。 本文件主要起草人：和习琼、王菊英、和晓堂、方子松、李朝凤、夏菊香、石涛、和平根、李光达、 李昊、和立宣。 DB5307/T50—2023 II引言 丽薯系列马铃薯是丽江市主要推广的马铃薯品种，为规范丽江市马铃薯原原种生产，打造最干净种 薯基地，丽江市农业科学研究所通过不断摸索，整理出一套适合本地条件的马铃薯丽薯系列原原种规范 化生产的关键技术，为加快关键技术在生产企业和新型经营主体的应用，特制定本规程。 文件的发布机构提请注意，声明符合本文件时，可能涉及到6.2条“一种组培接种用具冷却及摆放 支座”（中国实用新型专利，专利号ZL201420730394.1）及11.6条“马铃薯原原种生产过程中的植株 调控方法”（中国发明专利，专利号ZL201610100706.4）专利。 本文件的发布对于该专利的的真实性、有效性和范围无任何立场。 该专利持有人已经向本文件的发布机构承诺，他愿意同任何申请人在合理且无歧视的条款和条件下， 就专利授权许可进行谈判，该专利持有人的声明已在本文件的发布机构备案，相关信息可通过以下联系 方式获得： 专利持有人姓名：丽江市农业科学研究所 地址：丽江市古城区祥和路229号 联系电话：0888-5121611 请注意除上述专利外，本文件的某些内容仍可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利 的责任。 DB5307/T50—2023 1 丽薯系列马铃薯原原种生产技术规程 1范围 本文件规定了丽薯系列马铃薯原原种的术语和定义、脱毒试管苗组培室建设、培养基制作、接种、 试管苗培养、原原种生产温网室环境要求、移栽前的准备、移栽、移栽后管理、收获、种薯分级及包装、 贮藏的技术要求。 本文件适用于丽薯系列马铃薯原原种的生产。 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB5084农田灌溉水质标准 GB15618土壤环境质量农用地土壤污染风险管控标准（试行） GB18133马铃薯种薯 GB20464农作物种子标签通则 GB/T29375马铃薯脱毒试管苗繁育技术规程 GB/T29378马铃薯脱毒种薯生产技术规程 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 马铃薯丽薯系列 以育成的丽薯系马铃薯品种丽1号、丽2号、丽6号、丽7号、丽10号等14个品种。 原原种 符合GB18133马铃薯种薯标准，用于生产原种的种薯。 二次培养 第一次培养的丽薯系列脱毒试管苗剪苗时留下最底部的腋芽，在原瓶加入营养液，再次放入培养室 培养后，作为基础苗再次扩繁。 免扦插法 即不用扦插，直接将剪好的基础苗节段均匀地撒入培养瓶中，倒入已灭菌营养液，盖上瓶盖放入培 养室培养。 4脱毒试管苗组培室建设 DB5307/T50—2023 2 组培室建设在周围没有污染源，与大田隔离，具备向阳、通风、干燥、清洁的环境。应设置清洗室、 更衣室、配置灭菌室、接种室、培养室等功能区，培养室面积按生产丽薯系列马铃薯试管苗3 000 株/m2～ 4 000 株/m2设计，接种室、组培室每25m2配备两盏紫外灯或一台臭氧发生机和一台除湿机。 5培养基制作 5.1配制培养基 母液：配方参见附录A，硫酸亚铁储备液配制浓度为 200 倍，其余成分配制浓度为 100 倍。 培养基：MS+白糖30 g/L+卡拉胶（琼脂）6 g/L+活性碳粉1g/L+植物激素B9，pH5.8。调制过程： 先加入除CaCl2外的其他母液，依次加入白糖、卡拉胶、活性炭粉、植物激素B9，用冷水调成糊状，再 加入烧开的自来水调制，加至 2/3 后，加入CaCl2母液，定容，用HCl（HNO3）或NaOH将pH值调至 5.8。 营养液：无固化剂 3 倍-4 倍MS配方加适当植物激素B9，配制过程同上。 5.2培养基分装、灭菌和保存 配制好的培养基分装在组培瓶中，封装后，在 121℃、压强 103.4kPa条件下高压蒸汽灭菌30min， 冷却后移入接种室或无菌室保存，培养基最好在灭菌后 14 d内用完，最多不超过 30 d。 营养液分装、灭菌和保存过程同上。 6接种 6.1接种前准备 a)接种用具消毒：剪刀、镊子用牛皮纸包好、扎紧，与培养基共同灭菌。 b)接种室日常消毒：使用紫外灯或臭氧发生机消毒，干季每 7 d开一次，湿季每 3 d～5 d开一次， 紫外灯每次 10 h～12 h，臭氧发生机每次 0.5h～1h。每周用 3.8%～5.1%84消毒液稀释  50倍清洁地板，接种室保持门窗紧闭。空气湿度超过 60 %时，用除湿器除湿 8 h-24h。 c)工作人员准备：用肥皂洗手，换上已消毒的工作服，戴医用乳胶手套，操作前用 75 %酒精消 毒。 d)设备消毒：接种前用75%酒精擦拭超净工作台及所有工具，准备两套镊子、剪刀，酒精浸泡 30s后备用。启动超净工作台及接种室紫外灯，20min～30min后关闭所有紫外灯。 e)接种准备阶段：从培养室取出已培养  25 d以上，无污染的丽薯系列基础苗瓶，用  75 %酒精 擦拭培养基瓶周身，方可放入工作台。 6.2接种 将准备好的两套灭菌后接种用具，交替插入高温消毒器 300 ℃，10s后拿出倒插在组培接种用具冷 却及摆放支座（专利号ZL201420730394.1）上冷却备用。打开基础苗瓶进行瓶內剪苗，一芽一段，剪 苗部位选择在腋芽往下茎杆2/3处，剪完后用镊子分装至新培养基瓶中，无需扦插，按 0.6 段/cm2-0.8 段/cm2，计算单瓶接苗数，均匀平铺在培养基上，添加 5 ml～10 ml营养液后进行培养；剪苗后的原苗瓶 添加5 ml～10 ml营养液，二次培养；接种完成后，所有的培养基瓶标注编码转移至培养架上培养。 7试管苗的培养 DB5307/T50—2023 3 苗瓶均匀整齐排放在培养架上，行间距留有 3 cm～5 cm间隙。培养条件：白天温度 20 ℃～24 ℃， 夜晚温度 16 ℃～18 ℃，光照时间 10 h/d～12 h/d，光照强度2 000 Lux～3 000 Lux。污染瓶及时移出处 理，室内消毒方法同 6.1 接种室消毒 8原原种生产温网室环境要求 8.1温网室外部环境要求 宜选择在丽江地区海拔 2 200 m～3 200 m之间，气候冷凉、给排水条件好的区域；周围无大面积种 植茄科植物或易吸引蚜虫的作物；土壤质量应符合GB15618要求，水源符合农田灌溉水质标准GB5084 要求。 8.2消毒 缓冲间地面每隔 10 d撒石灰粉  0.1 cm～0.2 cm消毒；大棚生产工具专棚专用，防止病害交叉感染。 9移栽前准备 9.1大棚和苗床（基质）消毒 大棚和苗床使用前 1 个月，使用98%棉隆微粒剂熏蒸 20 d,通风 10 d以上,详细参见附录B。 9.2基质 苗床铺经灭菌的基质 10 cm～12 cm，移栽前 1 d浇透苗床，对畦面进行耙松处理。 10移栽 10.1移栽时间 移栽时间为 3 月底～8 月上旬。 10.2移栽密度 移栽密度为 120 株/m2～140 株/m2。 10.3移栽试管苗标准 培养 15 d～20 d、苗高 5 cm～7 cm、健壮无污染的脱毒试管苗。 10.4移栽方法 在苗床上横向开 4 cm～5 cm左右小沟，放入试管苗，由沟的两边往中间轻轻培土，尽量保证苗直立， 定植深度 3 cm～4 cm，移栽后及时以喷雾方式浇透定根水。 11移栽后管理 11.1遮阳 DB5307/T50—2023 4 移栽试管苗 5 d～7 d内，拉遮光率 65 %的遮阳网。 11.2水份管理 移栽试管苗 5 d～7 d内，土壤含水量保持在 80 %以上，苗长新根后至开花期逐渐控水至土壤含水量 60 %，结薯期须增加土壤含水量至 70 %～80 %，成熟期逐渐减少到 50 %～60 %，收挖前适时停止浇水， 土壤含水量低于40 %后收挖。 11.3环境温度控制 日间棚内温度超过 25 ℃时，需及时开窗通风散热；后期如遇气温骤降需关棚保温。 11.4施肥 根据苗情进行合理追肥 1 次～3 次，每次施复合肥（17-17-17）3 kg～8 kg。 11.5主要病、虫害及草害防治 马铃薯主要病、虫害及草害防治方法参见附录B 11.6植株高度调控 移栽后 40 d～50 d，植株高度 30 cm～40 cm时，采用“马铃薯原原种生产过程中的植株调控方法（ZL 201610100706.4）进行调控，喷施1 次～2 次。 12收获 完全成熟前两周，选择晴天进行收挖。当日晾晒待表皮干燥后剔除带病、带虫及损伤块茎再装袋， 每袋做好标记。 13种薯分级及包装 分装时按马铃薯原原种单薯重量进行分级，分级方法参见附录C（马铃薯原原种重量分级表）， 分级包装后，内外悬挂品种、等级、收获日期等标签。 14贮藏 使用冷库储藏，温度调至 2 ℃