ICS 67.050 SN B00/09 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 5122—2019 进出口食用动物、饲料喹诺酮类筛选检测 胶体金免疫层析法 Determination of quinolones in live animal and feeds for import and export- Colloidal gold immunoassay 2019-09-03发布 2020-03-01实施 中华人民共和国海关总署 发布 SN/T5122—2019 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由中华人民共和国海关总署提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国拱北海关。 本标准主要起草人：李忠、刘陆、薛良辰、陈朝方、曾川、钱振杰、潘亮、彭碧宁、蔡德玲、彭玉芬、陈敬、 明荔莉、范稚莉、蔡杰、陈晏。 业标准信息服务平台 SN/T 5122—2019 进出口食用动物、饲料喹诺酮类筛选检测 胶体金免疫层析法 1范围 本标准规定了进出口食用动物、饲料中恩诺沙星、环丙沙星、诺氟沙星、达氟沙星、伊诺沙星，培氟沙 星、氧氟沙星、氟甲喹、恶喹酸残留量的胶体金免疫层析检测方法。 本标准适用于食用动物猪（猪肉、猪肝、猪血、猪尿）、鸡（鸡肉、鸡肝、鸡血）、鱼、虾、饲料（饲料原 料、配合饲料、浓缩饲料、添加剂预混料）中恩诺沙星、环丙沙星、诺氟沙星、达氟沙星、伊诺沙星、培氟沙 星、氧氟沙星、氟甲喹、恶喹酸喹诺酮类药物残留量的的筛选检测。 2夫 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3原理 利用免疫测定中的竞争抑制法检测原理，以微孔滤膜为载体，氯金酸胶体金颗粒为固相标记抗体。 体。样品中的喹诺酮类药物在毛细渗移的过程中与胶体金标记的特异性多克隆抗体结合，抑制了抗体 结果为阴性。 4试剂和材料 4.1乙腈。 4.2甲醇。 4.3氮水。 4.4冰乙酸。 4.5无水硫酸钠。 4.6磷酸二氢钾。 4.7 磷酸氢二钠。 4.8 氯化钠。 4.9 氯化钾。 4.10 磷酸二氢钾。 4.11 磷酸。 4.12 氢氧化钠。 1 SN/T 5122—2019 4.131%乙酸乙腈：量取10mL冰乙酸，加乙腈990mL，混匀。 4.14PBS缓冲溶液：磷酸二氢钾：0.27g，磷酸氢二钠：1.42g，氯化钠：8g，氯化钾0.2g，加去离子水约 800mL充分搅拌溶解，然后加人磷酸调pH至7.4，最后定容到1000mL。 4.15氢氧化钠溶液（3mol/L）：称取120g氢氧化钠，在烧杯中溶解氢氧化钠，恢复至室温，将烧杯内 冷却后的溶液小心转人广口瓶中，加水至1000mL。 4.16浓盐酸。 4.17盐酸溶液（3mol/L）：取270mL浓盐酸，加水730mL，混匀。 4.18盐酸溶液（10mmol/L）：取3.3mL3mol/L盐酸溶液（4.17），加水定容至1000mL。 4.1910%盐酸-乙睛溶液：取100mL乙腈，加盐酸溶液（4.18）定容至1000mL。 4.205%甲醇水溶液：取5mL甲醇，加水定容至100mL。 4.2110%氨水甲醇溶液：取10mL氨水用甲醇定容100mL。 4.22标准品：恩诺沙星（Enrofloxacin）CAS号：93106-60-6，纯度98.5%、环丙沙星（Ciprofloxacin）CAS 号：85721-33-1，纯度94.0%诺氟沙星（Norfloxacin)CAS号：70458-96-7，纯度99.0%、洛美沙星（Lome floxacin)CAS号：98079-51-7，纯度98%、达氟沙星（Danofloxacin)CAS号：112398-08-0，纯度93.5%、伊 诺沙星（Enoxacin）CAS号：74011-58-8，纯度99.0%培氟沙星（Pefloxacin）CAS号：70458-92-3，纯度 99.0%、氧氟沙星（Ofloxacin）CAS号：82419-36-1，纯度99.0%、氟甲喹（Flumequine）CAS号：42835-25 6，纯度99.0%、恶喹酸（Oxolinicacid），CAS号：26893-27-6，纯度98% 储备液。4℃以下避光保存。 X 4.24诺酮类标准储标准工作液：准确移取喹诺酮类标准储备液1.0mL于100mL容量瓶中，用乙 睛稀释至刻度。配置成浓度为1.0μg/mL的标准工作溶液。4℃以下避光保存。 4.250.22μm微孔滤膜。 4.26聚苯乙烯吡咯烷酮填料固相萃取柱或相当者：3mL，60mg或性能相当者。使用前依次用3mL 甲醇、3mL水和3mL盐酸溶液（4.18）对柱子进行活化 4.27胶体金免疫层析快速检测试剂盒：包含胶体金免疫层析快速检测卡，样品稀释液等，见附录A。 标准信息服务平台 5仪器和设备 5.1分析天平：感量为0.01g和0.1mg。 5.2旋涡混合器。 5.3高速离心机：转速大于或等于15000r/min。 5.4离心机：转速大于或等于4000r/min。 5.5固相萃取装置。 5.6氮吹浓缩仪。 5.7 旋转蒸发仪。 5.8 超声波清洗器。 5.9 pH 计:0.01 pH。 试样的制备与保存 6.1试样制备 6.1.1食用动物样品 取有代表性组织样品约10g，混合均匀，用匀浆机均质，装人洁净容器内密封并做好标识；取有血浆 2