SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 4675.1—2016 出口葡萄酒中甘油的测定 酶法 Determination of glycerol in wine for export-Enzymatic method 行业标准信息服务平台 2016-12-12发布 2017-07-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T 4675.1—2016 前言 SN/T4675《出口葡萄酒质量安全分析方法》共分为30个部分： SN/T 4675.1 出口葡萄酒中甘油的测定酶法； SN/T 4675.2 出口葡萄酒中2,3-丁二醇的测定气相色谱法； SN/T4675.3 出口葡萄酒中乙醇稳定碳同位素比值的测定； SN/T 4675.4 出口葡萄酒中乳酸的测定酶法； SN/T4675.5 出口葡萄酒中有机酸的测定离子色谱法； SN/T4675.6 出口葡萄酒中葡萄糖、果糖和蔗糖的测定； SN/T 4675.7 出口葡萄酒中乙醛的测定气相色谱-质谱法； SN/T 4675.8 出口葡萄酒中5-羟甲基糠醛的测定液相色谱法； -SN/T 4675.9 出口葡萄酒中二甘醇的测定气相色谱-质谱法： SN/T4675.10 出口葡萄酒中赭曲霉毒素A的测定液相色谱-质谱/质谱法； SN/T4675.11 出口葡萄酒中7种花色苷的测定超高效液相色谱法； SN/T 4675.12 出口葡萄酒中溶菌酶的测定液相色谱法； SN/T 4675.13 出口葡萄酒中2，4，6-三氯甲苯醚残留量的测定气相色谱-质谱法； SN/T 4675.14 出口葡萄酒中纳他霉素的测定液相色谱-质谱/质谱法； SN/T4675.15 出口葡萄酒中水杨酸、脱氢乙酸和对氯苯甲酸的测定液相色谱法； SN/T4675.16 出口葡萄酒中富马酸的测定液相色谱-质谱/质谱法； SN/T 4675.17 出口葡萄酒中丁基锡含量的测定气相色谱-质谱/质谱法； SN/T 4675.18 出口葡萄酒中二硫代氨基甲酸酯残留量的测定顶空气相色谱法； -SN/T 4675.19 出口葡萄酒中钠、镁、钾、钙、铬、锰、铁、铜、锌、砷、硒、银、镉、铅的测定； SN/T 4675.20 出口葡萄酒中稀土元素的测定电感耦合等离子体质谱法； SN/T 4675.21 出口葡萄酒中可溶性无机盐的测定离子色谱法； SN/T4675.22 出口葡萄酒中总二氧化硫的测定比色法； SN/T 4675.23 出口葡萄酒及葡萄汁中氨氮的测定连续流动分析仪法； -SN/T4675.24 出口葡萄酒福林肖卡指数的测定分光光度计法： SN/T 4675.25 出口葡萄酒颜色的测定CIE1976（L"a"b*）色空间法； SN/T 4675.26 出口葡萄酒浊度的测定散射光法； 务平 SN/T 4675.27 出口葡萄酒碱性灰分的测定； SN/T4675.28 出口葡萄酒细菌、霉菌及酵母的计数； SN/T 4675.29 出口葡萄酒中酒香酵母检验实时荧光PCR法； SN/T4675.30 出口葡萄酒中拜氏接合酵母检验实时荧光PCR法。 本部分为SN/T4765的第1部分。 本部分按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本部分等同采用国际葡萄与葡萄酒组织（OIV)的方法OIV-MA-AS312-05《甘油》。本部分在技术 内容上与该方法一致 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 1 SN/T 4675.1—2016 本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本部分起草单位：中华人民共和国广东出入境检验检疫局、中国检验检疫科学研究院、拜发分析系 统销售有限公司、中华人民共和国新疆出入境检验检疫局 本部分主要起草人：李志勇、刘青、刘朝霞、张子皓、谢锦锋、梁瑞婷、冯峰、张峰、廖冰君、陈胤瑜、 王京、宦萍。 行业标准信息服务平台 Ⅱ SN/T4675.12016 出口葡萄酒中甘油的测定 酶法 1范围 本部分适用于葡萄酒中甘油含量的测定。 2 规范性引用文件 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3 方法原理 葡萄酒中的甘油在甘油激酶（GK）的催化作用下，甘油可与三磷酸腺苷（ATP）进行磷酸化反应，生 成甘油-3-磷酸和二磷酸腺苷（ADP）： GK→甘油-3-磷酸+ADP 反应(1)：甘油+ATP 所生成的二磷酸腺苷（ADP)在丙酮酸激酶（PK)的作用下，被磷酸烯醇丙酮酸（PEP)转化成ATP， 同时生成丙酮酸： 反应（2)：ADP+PEP →ATP+丙酮酸 丙酮酸在乳酸脱氢酶（LDH)作用下，被还原剂烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH)还原成乳酸： 在该反应过程中所生成的NAD+的数量与甘油数量成正比。NADH的氧化程度是通过它在波长 334nm、340nm或365nm处的衰减程度来测定。 将试样加水稀释，然后往比色血依次加人缓冲液、反应液、试样稀释液和酶液进行反应，采用分光光 度计测定吸光度变化，利用吸光度差值定量。 4试剂和材料 除另有规定外，所用试剂均为分析纯，试验用水为GB/T6682规定的一级水 4.1 氢氧化钠（NaOH)。 4.2 甘氨酰甘氨酸（C,H.N,O）。 4.3 硫酸镁（MgSO·7H,0)。 4.4 还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸二钠（NADH）。 4.5 三磷酸腺苷（ATP）。 4.6 磷酸烯醇丙酮酸(PEP)。 4.7 碳酸氢钠（NaHCO）。 4.8 丙酮酸激酶(PK)。 1